МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
РЯЗАНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ
имени академика И.П.ПАВЛОВА
ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени
кандидата биологических наук
Научный руководитель
Заслуженный деятель науки РФ,
доктор медицинских наук, профессор В.Г.Макарова,
Рязань-2001
ПУНЯКИН Алексей Константинович
БИОХИМИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА ПРИМЕНЕНИЯ
БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ
ПРОДУКТОВ ПЧЕЛОВОДСТВА
В СПОРТИВНОЙ МЕДИЦИНЕ
Содержание
Глава 2.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1.
Критерии включения спортсменов в серии
эксперимента и схемы введения апипрепаратов.
Для выполнения поставленной цели и задач под наблюдением находи¬лось 240 спортсменов-мужчин в возрасте от 18 до 24 лет.
При создании экспериментальных серий (всего 6 – по спортивной спе-циализации) мы объединили спортсменов, занимающихся сходными видами спорта:
А. Циклические виды спорта:
1. «Силовые виды спорта» – тяжелая атлетика
2. «Скоростные виды спорта» – легкоатлеты-спринтеры
3. «Виды спорта, развивающие выносливость» -легкоатлеты-стайеры
4. «Виды спорта, связанные с длительным охлаждением тела» – плаванье (вольный стиль) и лыжный спорт
Б. Ациклические виды спорта:
5. «Виды спорта, развивающие координацию движений» – автоспорт, тэк- вондо и каратэ
6. «Спортивные игры» – футбол и баскетбол.
Серию контроля составили 48 спортсменов соответствующих спортивных специализаций, не принимавших апипрепараты.
Критерии включения спортсменов в экспериментальную серию:
1. Наличие соответствующей спортивной специализации
2. Наличие спортивной квалификации кандидата в мастера спорта
3. Согласие на участие, регулярный прием апипрепаратов, самоконтроль и проведение лабораторных исследований.
4. Отсутствие аллергии на продукты пчеловодства в анамнезе
5. Отсутствие фазы обострения хронических заболеваний
6. Предсоревновательный период спортивной подготовки Критерии исключения из экспериментальной серии:
1. Непереносимость продуктов пчеловодства
2. Возникновение пред-, и патологических состояний (перетренированность, выявление нарушений функции внутренних органов и др.)
3. Отказ от участия в эксперименте
4. Окончание эксперимента
Мед (полифлерный) применяли курсом по 2 недели по 1 столовой ложке 3 раза в день (примерно 50 г, или 1 г/кг массы тела/сутки) [Младенов С., 1991; Макарова В.Г. с соавт., 2000] до еды, запивая теплой кипяченой водой.
Маточное молоко (таблетки “Апилактин” по 0,01 г.) применяли курсом 2 недели по 1 таблетке 3 раза в день сублингвально [Макарова В.Г. с соавт., 2000].
Цветочную пыльцу-обножку применяли курсом 2 недели по 1 десертной ложке (примерно 10 г) 3 раза в день натощак или за 10-15 минут до еды запивая водой [Макарова В.Г. с соавт., 2000].
Апикомпозицию «Апитонус» применяли курсом 2 недели в дозе 500 мг/кг массы тела 1 раз в день натощак.
2.2.
Методы определения показателей ферментного,
пигментного, белкового, углеводного,
минерального и липидного обмена
Для проведения комплекса биохимических исследований утром нато¬щак через одну иглу в два одноразовых шприца (2-х и 5-граммовый) забира¬лась кровь из локтевой вены.
Из 2-х граммового шприца гепаринизированная кровь использовалась для исследования гемоглобина и параметров ПОЛ.
Кровь из 5-граммового шприца немедленно переносилась в маркиро¬ванную центрифужную пробирку, выдерживалась до образования сгустка и после его отделения негемолизированная сыворотка (при гемолизе кровь за¬биралась повторно) использовалась для дальнейших исследований.
Исследование активности АлАТ, АсАТ и содержания общего белка, би-лирубина (общего и прямого), глюкозы, калия, натрия, кальция, магния, мо¬чевины, холестерина, холестерина ЛПВП, триглицеридов проводилось на биохимическом анализаторе – фотометре “HUMALYZER 2000” с использова¬нием готовых жидких реактивов фирмы “HUMAN” (Германия).
2.3.
Определение активности
переписного окисления липидов
Концентрацию малонового диальдегида (МДА) в сыворотке крови спортсменов определяли фотометрическим методом, описанным И.Д. Сталь¬ной и Т.Г. Гаришвили (1977). Принцип метода основан на реакции МДА с тиобарбитуровой кислотой с образованием триметилового комплекса. Изме¬рение поглощения окрашенного раствора проводилось на фотометре “HUMALYZER 2000” при длине волны 532 нм. Концентрацию МДА выража¬ли в нмоль /мл.
Об активности систем ферментативно инициируемого (НАДФ-Н- зависимого) и неферментативного (аскорбат-зависимого) ПОЛ судили по скорости накопления МДА в крови, уровень которого оценивали фотометри¬чески через 20 минут инкубации при 37°С по тесту с тиобарбитуровой кисло¬той. В качестве прооксидантов в системах переокисления липидов использо¬вали НАДФ-Н и аскорбиновая кислота в присутствии ионов железа [А.И. Ар- чаков и соавт., 1983]. Активность НАДФ-Н-ПОЛ и аскорбат-ПОЛ выражали в нмоль/мл-мин.
2.4.Статистическая обработка
полученных данных
Все первичные экспериментальные данные были подвергнуты обработке на персональном компьютере «Celeron-400A» в среде «Microsoft Windows 98 DVM» с использованием программы-спредшита «Microsoft Excel 97» из стан¬дартной версии офисного пакета «Microsoft Office 97».
Для расчетов среднего значения и среднего квадратичного отклонения среднего значения использовали стандартные статистические функции
32
«Microsoft Excel 97», значение критерия достоверности различия t Стьюдента определяли в ячейках спредшита по формуле, описанной Стентоном Гланцем (1999). Различие средних считали достоверным при соответствующем вероятности безошибочного прогноза в 95% [Стентон Г., 1999].