А.С. Васильев «Фармакологические эффекты экстрактов экдистероидсодержащих растений в условиях повышенной вязкости крови». 4.6.

ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ
«НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ФАРМАКОЛОГИИ»
СИБИРСКОГО ОТДЕЛЕНИЯ
РОССИЙСКОЙ АКАДЕМИИ МЕДИЦИНСКИХ НАУК

Диссертация
на соискание ученой степени

Автор:

ВАСИЛЬЕВ АЛЕКСАНДР СЕРГЕЕВИЧ

ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИЕ ЭФФЕКТЫ ЭКСТРАКТОВ
ЭКДИСТЕРОИДСОДЕРЖАЩИХ РАСТЕНИЙ
В УСЛОВИЯХ МОДЕЛЕЙ
СИНДРОМА ПОВЫШЕННОЙ ВЯЗКОСТИ КРОВИ

4.6.1.
Влияние экстракта левзеи сафлоровидной
на структурно- метаболическое состояние эритроцитов
в условиях моделей
сердечно-­сосудистых и эндокринных расстройств

4.6.1.1.
Влияние экстракта левзеи сафлоровидной
на структурно-метаболическое состояние
эритроцитов в условиях модели
ишемии головного мозга

У интактных крыс Вистар в периферической крови основная доля эритро­цитов была представлена дискоцитами (85,03±0,15%). Содержание переходных форм (клеток еще способных к деформации) было 12,76±0,12%. В этой группе наибольшее количество приходилось на эритроциты в форме плоских дисков (5,18±0,19%), дискоцитов с выростом (4,97±0,12%) и дискоцитов с гребнем (1,81±0,07%). Количество клеток в виде эллипса, дискоцитов с множественны­ми выростами и эритроцитов в виде тутовой ягоды не превышало в сумме 1%. Доля предгемолитических форм составила 1,62±0,10% (куполообразные эрит­роциты – 0,55±0,07%; сферические эритроциты – 0,71 ±0,06%; в виде спущенно­го мяча – 0,36±0,06%). На дегенеративные формы приходилось 0,56±0,07% от общего количества эритроцитов (табл. 102).
У интактных крыс Вистар общее содержание белка в эритроцитарных мембранах составило 4,14±0,49 мг/мл суспензии теней эритроцитов. Количест­во липидов достигало величины 1,97±0,10 мг/мг белка, почти половина этого количества приходилась на долю фосфолипидной фракции (0,96±0,05 мг/мг белка) (табл. 103). Методом тонкослойной хроматографии выявлялись два ос­новных компонента, входящие в состав эритроцитарных мембран – холестерин и фосфолипиды, их соотношение составило 1,05±0,11. Исследование фосфоли­пидной фракции показало, что на фосфатидилэтаноламин (ФЭА), фосфатидил- серин (ФС), фосфатидилхолин (ФХ) и сфингомиелин (СМ) приходится соответ-ственно 24±3%, 24±2%, 37±3% и 11±1%. Доля фракции лизофосфолипидов (ЛФЛ) составляла 4±1% (табл. 104, рис. 7).
Через 5 суток после воспроизведения ишемии головного мозга в перифе­рической крови крыс достоверно снизилось содержание дискоцитов до 83,35±0,16%. Статистически значимо повышалась доля переходных форм (до 13,70±0,22%), за счет возрастания количества эритроцитов в форме плоского диска и дискоцитов с гребнем. Содержание эритроцитов других морфологиче­ских форм, относящихся к переходным формам достоверно не изменилось. Ко­личество предгемолитических форм увеличивалось по сравнению с интактной группой в 1,3 раза и достигало 2,08±0,10%. У крыс с ишемией головного мозга, среди эритроцитов с предгемолитической формой, преобладали клетки в виде спущенного мяча и минимальным было количество сферических эритроцитов, в отличие от здоровых животных, где соотношение форм было диаметрально противоположным. Число дегенеративных форм эритроцитов увеличивалось до 0,86±0,07% (табл. 102).
У крыс Вистар к 5-м суткам после перевязки сонных артерий содержание белка в мембранах составило 3,97±0,58 мг/мл суспензии теней эритроцитов, что достоверно не отличалось от значений интактной группы. Наблюдалось досто­верное снижение, по сравнению с интактными животными, содержания липи- дов в тенях эритроцитарных мембран до 1,36±0,08 мг/мг белка. На 34% умень­шилось общее количество фосфолипидов и составило 0,63±0,02 мг/мг белка (табл. 103). Содержание холестерина в мембранах эритроцитов крыс с ишемией головного мозга снижалось до 0,73±0,12, однако различия с группой интактных животных не являлись достоверными. Также не обнаружено достоверных раз­личий в соотношении холестерин/фосфолипиды между группой интактных и ишемизированных животных (1,05±0,11 и 1,16±0,07 соответственно). В связи с этим, можно утверждать, что снижение общего количества липидов происходи­ло в равной степени, как за счет холестерина, так и фосфолипидов. Среди фос­фолипидов максимальным было уменьшение содержания ФХ (от 0,354±0,020 мг/мг белка у интактных животных до 0,140±0,011 мг/мг белка в контрольной
группе) и СМ (от 0,110±0,008 мг/мг белка до 0,057±0,002 мг/мг белка). В мень­шей степени снижалось количество ФС (на 24% по сравнению со значениями интактной группы). Содержание ФЭА достоверно не отличалось у интактных и контрольных крыс. На фоне снижения общего количества фосфолипидов в эритроцитарных мембранах при ишемии головного мозга достоверно возросло содержание фракции лизофосфолипидов до 0,052±0,003 мг/мг белка, по срав­нению с интактными животными (0,039±0,002 мг/мг белка) (табл. 104). В раз­ной степени выраженное изменение содержания отдельных фосфолипидов при­вело к значимому сдвигу их соотношения. Так, максимальной стала доля ФЭА (32±2%). Процентное содержание ФХ, ФС и СМ составило 22±2%, 28±1% и 10±1% соответственно. Значительно увеличилось относительное содержание ЛФЛ, от 4±1% у интактных животных до 8±1% при ишемии (рис. 7).
При ишемии головного мозга у крыс наблюдалось изменение соотношения компонентов фосфолипидов наружного и внутреннего слоев эритроцитарной мембраны, что выражалось в уменьшении содержания ФХ и СМ (наружный монослой) и возрастании относительной доли ФЭА и ФС (внутренний моно­слой) (рис. 8).
У крыс с ишемией головного мозга, получавших в течение 5 суток ЭЛС в дозе 150 мг/кг ежедневно, содержание дискоцитов в периферической крови со­ставило 84,98±0,26%, что достоверно выше, чем в контрольной группе (табл. *
102). Количество переходных форм в опытной группе было статистически зна­чимо меньше не только чем в контроле, но также в сравнении с интактными значениями. Снижение числа эритроцитов с переходной формой происходило за счет достоверного уменьшения доли клеток в виде плоского диска и диско­цитов с гребнем. У крыс опытной группы наблюдалось достоверное возраста­ние, по сравнению с контрольной группой, всех групп эритроцитов с предгемо- литической формой (до 2,87±0,12%). Следует отметить, что у леченных живот­ных, в отличие от контроля, также как и у интактных животных среди предгемолитических форм максимальным было число сферических эритроцитов и предгемолитических форм было близко к таковому у интактных животных. Ис­пользование ЭЛС препятствовало росту числа эритроцитов дегенеративной формы. Так, их доля в опытной группе составила 0,48±0,05%, что в 1,8 раза ни­же, чем в контрольной группе и достоверно не отличается от значения у ин­тактных животных. У животных с ишемией головного мозга, получавших ЭЛС, содержание белка составило 4,05±0,41 мг/мл суспензии теней эритроцитов, что достоверно не отличалось ни от интактной группы, ни от контроля (табл. 103). Количество общих липидов достоверно превышало значения у контрольных животных, но не достигало уровня показателя в интактной группе. Общее количество фосфо- липидов достоверно возрастало по сравнению с контролем до 0,77±0,05 мг/мг белка. Соотношение холестерин/фосфолипиды составило 0,90±0,10, что свиде­тельствует об однонаправленном изменении содержания в эритроцитарных мембранах как количества холестерина, так и фосфолипидной фракции. Коли­чество ФЭА и ФХ у крыс, получавших исследуемый экстракт, достоверно не отличалось от значений в контрольной группе (табл. 104). Содержание ФС и СМ составило соответственно 0,224±0,011 мг/мг белка и 0,124±0,011 мг/мг бел­ка, что достоверно выше контрольных значений и не отличается от количества этих фосфолипидов у интактных животных. Под действием ЭЛС наблюдалось достоверное снижение количества ЛФЛ до уровня интактных животных. Про­центное соотношение массовых долей ФХ и ФС у животных, получавших ЭЛС, соответствовало аналогичным показателям в контрольной группе (рис. 7). Дос­товерно, по сравнению с контролем, снижалась доля ФЭА и возрастала доля ФС. Процент лизофосфолипидов снижался до 5±1%, что не отличалось от зна­чений интактной группы. ЭЛС при курсовом применении у крыс с ишемией го­ловного мозга способствовал восстановлению процентного содержания компо­нентов наружного слоя мембран эритроцитов – СМ и ФХ (рис. 8).
Таким образом, курсовое применение ЭЛС у крыс с ишемией головного мозга препятствует процессам деградации эритроцитов, за счет положительно­го влияния на липидный спектр мембран красных клеток крови.

Таблица 102

Влияние курсового (5 дней) внутрижелудочного введения экстракта левзей сафлоровидной (ЭЛС) в дозе 150 мг/кг на структуру популяции эритроцитов (в %) по особенностям их поверхностной архитектоники у крыс с ишемией голов­ного мозга (по данным сканирующей электронной микроскопии)

Группа Интактные животные Ишемия головного мозга
Контроль ЭЛС (опыт)
Дискоциты 85,03±0,15 83,35±0,16* 84,98±0,26+
Переходные Формы Эллипсы 0,33±0,04 0,36±0,04 0,47±0,03*
Плоские диски 5,18±0,19 5,91±0,21* 4,57±0,11*+
Дискоциты с вы­ростом 4,97±0,12 4,60±0,.18 4,53±0,20
Дискоциты с гребнем 1,81±0,07 2,21±0,07* 1,60±0,03*+
Дискоциты с
множественными
выростами 0,42±0,03 0,43±0,04 0,43±0,03
Эритроциты в виде тутовой ЯГО­ДЫ 0,05±0,02 0,08±0,03 0,07±0,03
Всего 12,76±0,12 13,70±0,22* 11,67±0,25*+
Предгемолитические фор­мы Куполообразные эритроциты 0,55±0,07 0,68±0,04 0,90±0,09*+
Сферические эритроциты 0,71±0,06 0,30±0,05* 1,13±0,06*+
Эритроциты в виде спущенного мяча 0,36±0,06 1,10±0,03* 0,83±0,06*+
Всего 1,62±0,10 2,08±0,10* 2,87±0,12*+
Дегенеративные формы 0,56±0,07 0,86±0,07* 0,48±0,05+і»
Влияние курсового (5 дней) внутрижелудочного введения экстракта левзей сафлоровидной (ЭЛС) в дозе 150 мг/кг на содержание в мембранах эритроцитов белка (в мг/мл суспензии теней эритроцитов), общих липидов (в мг/мг белка), общих фосфолипидов (в мг/мг белка), холестерина (мг/мг белка) и отношение холестерин/фосфолипиды у крыс с ишемией головного мозга

Показатели Интактные животные Ишемия головного мозга
Контроль ЭЛС (опыт)
Белок 4,14±0,49 3,97±0,58 4,05±0,41
Общие липиды 1,97±0,10 1,36±0,08* 1,67±0,04*+
.Общие фосфолипиды 0,96±0,05 0,63±0,02* 0,77±0,05*+
Холестерин 1,01±0,08 0,73±0,12 0,90±0,10
Холестерин/Фосфолипиды 1,05±0,11 1,16±0,07 1,17±0,08

Примечание: * – р<0,05 в сравнении с интактными животными; + – р<0,05 в сравнении с контролем

Таблица 104

Влияние курсового (5 дней) внутрижелудочного введения экстракта левзей сафлоровидной (ЭЛС) в дозе 150 мг/кг на содержание в мембранах эритроцитов (в мг/мг белка) фосфатидилэтаноламина (ФЭА), фосфатидилсерина (ФС), фос- фатидилхолина (ФХ), сфингомиелина (СМ) и лизофосфолипидов (ЛФЛ) у крыс с ишемией головного мозга

Показатели Интактные животные Ишемия головного мозга
Контроль ЭЛС (опыт)
ФЭА 0,226±0,024 0,204±0,015 . 0,216±0,018
ФС 0,231±0,015 0,176±0,012* 0,224±0,011+
ФХ 0,354±0,020 0,140±0,011* 0,170±0,021*
СМ 0,110±0,008 0,057±0,002* 0,124±0,011+
ЛФЛ 0,039±0,002 0,052±0,003* 0,039±0,003+

4.6.1.2.
Влияние экстракта левзеи сафлоровидной
на структурно- метаболическое состояние эритроцитов
в условиях модели
инфаркта миокарда

На 5-е сутки после моделирования инфаркта миокарда в периферической крови крыс достоверно снизилось содержание дискоцитов до 80,36±0,29%. Ста­тистически значимо, по сравнению с интактной группой, повышалась доля пе­реходных форм (до 15,56±0,24%), в основном за счет возрастания количества дискоцитов с выростом и эллипсов. Доля эритроцитов в виде тутовой ягоды также достоверно увеличилась. Содержание других морфологических видов эритроцитов, относящихся к переходным формам, в сравнении с интактными животными, достоверно не изменялось. Количество предгемолитических форм увеличивалось по сравнению с интактной группой в 2,1 раза и достигало 3,34±0,10%. Достоверно возросла доля всех форм эритроцитов, относящихся к данной группе, однако соотношение их (преобладание клеток куполообразной и сферической формы) было подобно интактным животным. Число дегенера­тивных форм эритроцитов у крыс с инфарктом миокарда увеличивалось до 0,79±0,04%, что значимо выше, чем аналогичный показатель у здоровых крыс (табл. 105).
, У крыс Вистар к 5-м суткам после создания инфаркта миокарда содержа­ние белка в мембранах составило 4,34±0,49 мг/мл суспензии теней эритроцитов и статистически значимо не отличалось от значений в интактной группе. Со­держание липидов в тенях эритроцитарных мембран уменьшалось до 1,36±0,08 мг/мг белка, что достоверно ниже, по сравнению с интактными животными. Общее количество фосфолипидов в контрольной группе снизилось по сравне­нию со здоровыми животными на 22% (табл. 106). У животных с инфарктом миокарда происходило статистически значимое снижение содержания холесте­рина, однако соотношение холестерин/фосфолипиды не отличалось от значе­ние в интактной группе, что свидетельствует об уменьшении количества холе­стерина в той же степени, что и фосфолипидной фракции. Среди фосфолипидов максимальным было снижение содержания ФХ (от 0,354±0,020 мг/мг белка у интактных животных до 0,201 ±0,019 мг/мг белка в контрольной группе) и СМ (от 0,110±0,008 мг/мг белка до 0,081 ±0,007 мг/мг белка) (табл. 107). Количество ФЭА и ФС составило соответственно 0,202±0,015 мг/мг белка и 0,211±0,008 мг/мг белка и достоверно не отличалось от аналогичных показателей у интакт­ных животных (табл. 107). Достоверно возросло по сравнению с интактными крысами количество лизофосфолипидов (до 0,048±0,003 мг/мг белка) (табл. 107). Следствием изменения количества отдельных фосфолипидов явился сдвиг их процентного соотношения. Так, доли ФЭА, ФС и ФХ стали равными и со­ставили соответственно 27±2%, 29±1% и 21 ±2%. Процентное число СМ (11±1%) по сравнению с интактными животными не изменилось. Наблюдалось увеличение относительного содержания лизофосфолипидов от 4±1% у интакт­ных животных до 6±1% при инфаркте миокарда (рис. 9).
У крыс с инфарктом миокарда наблюдается уменьшение процентного со­держания фосфолипидов (СМ и ФХ), формирующих наружный слой мембраны эритроцита и относительное увеличение компонентов внутреннего слоя – ФЭА и ФС (рис. 10).
У крыс с инфарктом миокарда, получавших в течение 5 суток ЭЛС в дозе 150 мг/кг ежедневно, содержание дискоцитов в периферической крови состави­ло 83,12±0,15%, что достоверно выше, чем в контрольной группе (табл. 105). Количество переходных форм в опытной группе составило 13,88±0,21%, что достоверно меньше контрольных значений. Снижение переходных форм про­исходило за счет достоверного уменьшения количества клеток в форме эллип­са, дискоцитов с выростом и дискоцитов с множественными выростами. Доля предгемолитических форм у крыс, получавших ЭЛС была достоверно меньше, по сравнению с контрольной группой (2,47±0,08%), за счет снижения количест­ва куполообразных и сферических эритроцитов. Использование ЭЛС препятст­вовало возрастанию доли дегенеративно измененных эритроцитов. Так, их чис­ло в опытной группе составило 0,53±0,08%, что значимо меньше, чем в контро­ле, и достоверно не отличается от значения у интактных животных (табл. 105).
При курсовом введении ЭЛС в условиях модели инфаркта миокарда со­держание белка в эритроцитарных мембранах составило 4,45±0,28 мг/мл сус­пензии теней эритроцитов, что достоверно не отличается ни от значений в ин­тактной группе, ни от контроля (табл. 106). Общее количество липидов (1,62±0,09 мг/мг белка) было выше, чем в контрольной группе, однако эти из­менения не достигали уровня необходимой статистической значимости. Со­держание фосфолипидной фракции (0,84±0,06 мг/мг белка) достоверно не от­личалось от уровня в контроле, вместе с тем не было достоверных различий и с группой интактных животных. Под влиянием курсового введения ЭЛС содер­жание холестерина и отношение холестерин/фосфолипиды достоверно не отли­чались ни от интактных значений, ни от контроля (табл. 107). Количество ФС и СМ у крыс, получавших ЭЛС, составило соответственно 0,259±0,015 мг/мг бел­ка и 0,125±0,012 мг/мг белка, что было достоверно выше, чем в контроле и не отличалось от значений в интактной группе (табл. 107). Содержание ФХ (0,217±0,013 мг/мг белка) статистически значимо, по сравнению с контролем не изменялось. У крыс, получавших ЭЛС, содержание ЛФЛ составило 0,025±0,004 мг/мг белка, что достоверно ниже, чем у контрольных животных. Процентное соотношение массовых долей ФЭА, ФС и ФХ у животных, получавших экс­тракт, соответствовало аналогичным показателям в контрольной группе, а доля СМ была достоверно выше (рис. 9). Процент лизофосфолипидов снижался до значений в интактной группе. При использовании ЭЛС у крыс с инфарктом миокарда наблюдалось частичное восстановление процентного содержания фосфолипидов наружного слоя биомембраны (СМ и ФХ) (рис. 10).
Таким образом, курсовое применение ЭЛС у крыс с инфарктом миокарда способствовало снижению дегенеративных изменений эритроцитов перифери­ческой крови за счет нормализации липидного состава мембран красных кле­ток.

Таблица 105

Влияние курсового (5 дней) внутрижелудочного введения экстракта левзей сафлоровидной (ЭЛС) в дозе 150 мг/кг на структуру популяции эритроцитов (в %) по особенностям их поверхностной архитектоники у крыс с инфарктом мио­карда (по данным сканирующей электронной микроскопии)

Группа Интактные животные Инфаркт миокарда
Контроль ЭЛС (опыт)
Дискоциты 85,03±0,15 80,36±0,29* 83,12±0,15*+
Переходные формы Эллипсы 0,33±0,04 0,88±0Д0* 0,58±0,04*+
Плоские диски 5,18±0,19 5,64±0,21 5,63±0,15*
Дискоциты с вы­ростом 4,97±0,12 5,94±0,08* 5,52±0,09*+
Дискоциты с гребнем 1,81±0,07 2,00±0,07 1,93±0,03
Дискоциты с
множественными
выростами 0,42±0,03 1,00±0ДЗ* 0,13±0,02*+
Эритроциты в виде тутовой ЯГО­ДЫ 0,05±0,02 0Д0±0,01* 0,08±0,02
Всего 12,76±0Д2 15,56±0,24* 13,88±0,21*+
* Предгемолитические фор­мы Куполообразные эритроциты 0,55±0,07 1,30±0,05* 0,72±0,05+
Сферические эритроциты 0,71±0,06 1,34±0,04* 1,08±0,05*+
Эритроциты в виде спущенного мяча . 0,36±0,06 0,70±0,05* 0,67±0,07*
Всего 1,62±0Д0 3,34±0,10* 2,47±0,08*+
Дегенеративные формы 0,56±0,07 0,79±0,04* 0,53±0,08+

Таблица 106

Влияние курсового (5 дней) внутрижелудочного введения экстракта левзеи сафлоровидной (ЭЛС) в дозе 150 мг/кг на содержание в мембранах эритроцитов белка (в мг/мл суспензии теней эритроцитов), общих липидов (в мг/мг белка), общих фосфолипидов (в мг/мг белка), холестерина (мг/мг белка) и отношение холестерин/фосфолипиды у крыс с инфарктом миокарда

Показатели Интактные животные Инфаркт миокарда
Контроль ЭЛС (опыт)
Белок 4,14±0,49 4,34±0,49 4,45±0,28
Общие липиды 1,97±0,10 1,36±0,08* 1,62±0,09*
Общие фосфолипиды 0,96±0,05 0,75±0,02* 0,84±0,06
Холестерин 1,01±0,08 0,61±0,04* 0,78±0,05
Холестерин/Фосфолипиды 1,05±0,11 0,81±0,05 0,93±0,07
Примечание: * – р<0,05 в сравнении с интактными животными

Таблица 107

Влияние курсового (5 дней) внутрижелудочного введения экстракта левзеи сафлоровидной (ЭЛС) в дозе 150 мг/кг на содержание в мембранах эритроцитов (в мг/мг белка) фосфатидилэтаноламина (ФЭА), фосфатидилсерина (ФС), фос- фатидилхолина (ФХ), сфингомиелина (СМ) и лизофосфолипидов (ЛФЛ) у крыс с инфарктом миокарда

Показатели Интактные животные Инфаркт миокарда
Контроль ЭЛС (опыт)
ФЭА 0,226±0,024 0,202±0,015 0,234±0,011
ФС 0,231±0,015 0,211±0,008 0,259±0,015+
ФХ 0,354±0,020 0,201±0,019* 0,217±0,013*
СМ 0,110±0,008 0,081±0,007* 0,125±0,012+
ЛФЛ 0,039±0,002 0,048±0,003* 0,025±0,004*+

27%
25%

37%
24%
Интактные

гі%\
27%
Инфаркт миокарда
30%
Инфаркт миокарда + ЭЛС
Рис. 9. Влияние курсового (5 дней) внутрижелудочного введения экстракта лев­зей сафлоровидной (ЭЛС) в дозе 150 мг/кг на соотношение фосфолипидных фракций в мембранах эритроцитов у крыс с инфарктом миокарда.ЕЭФосфатидилэтаноламин □ Фосфатидилхолин
□ Фосфатидилсерин
□ Сфин го миелин
80%
60%
4 0%
2 0%
0%
элс
100% –

Интактные Контроль
Наружный слой
Внутренний слой

Рис. 10. Влияние курсового (5 дней) внутрижелудочного введения экстракта левзей сафлоровидной (ЭЛС) в дозе 150 мг/кг на соотношение фосфолипидов внутреннего и наружного слоя в мембранах эритроцитов у крыс с инфарктом миокарда.

4.6.1.3.
Влияние экстракта левзеи сафлоровидной
на структурно-метаболическое состояние
эритроцитов в условиях модели
артериальной гипертензии

Исследование поверхностной архитектоники эритроцитов методом скани­рующей электронной микроскопии показало, что в периферической крови крыс линии 8НЯ достоверно снижено, по сравнению с крысами Вистар, содержание дискоцитов до 80,60±0,24%. Статистически значимо была повышена доля пере­ходных форм (до 15,21 ±0,10%) за счет возрастания количества эритроцитов в форме эллипса, плоского диска, дискоцитов с выростом и с гребнем. Содержа­ние эритроцитов других морфологических форм, относящихся к переходным формам достоверно не изменилось. Количество предгемолитических форм уве­личивалось по сравнению с интактной группой в 1,8 раза и достигало 2,99±0,14%. У крыс с артериальной гипертензией среди клеток с предгемолити- ческой формой преобладали куполообразные эритроциты и минимальным было количество эритроцитов в виде спущенного мяча. Число дегенеративных эрит­роцитов составило 1,21±0,07%, что в 2,1 раза больше, чем у крыс линии Вистар (табл. 108).
У крыс линии 8НЯ содержание белка в мембранах составило 4,00±0,58 мг/дол суспензии теней эритроцитов, что не отличалось от аналогичного показа­теля у крыс Вистар. Наблюдалось достоверное снижение содержания липидов в тенях эритроцитарных мембран до 1,29±0,04 мг/мг белка. Общее количество фосфолипидов составило 0,59±0,03 мг/мг белка, что на 39% ниже, чем у нормо- тензивных крыс (табл. 109). У крыс с артериальной гипертензией нами отмече­но повышение относительной доли холестерина. Так, соотношение холесте- рин/фосфолипиды составило 1,19±0,03, что достоверно выше по сравнению с крысами Вистар. Среди фосфолипидов максимальным было снижение, по срав­нению с нормотензивными крысами, содержания ФХ (до 0,110±0,018 мг/мг бедка) и СМ (до 0,067±0,004 мг/мг белка). Наблюдаемое уменьшение количест­ва ФЭА и ФС не достигало уровня статистической значимости. В эритроцитар­ных мембранах крыс с артериальной гипертензией содержание фракции лизо- фосфолипидов составило 0,049±0,004 мг/мг белка (табл. 110). В разной степени выраженное изменение содержания отдельных фосфолипидов привело к зна­чимому сдвигу их соотношения. Так, максимальными стали доли ФЭА и ФС, соответственно 30±2% и 31±1%. Процентное содержание ФХ значительно уменьшалась (до 20±1%), а процентная доля СМ, несмотря на снижение его со­держания, осталась неизменной (11±1%). Значительно увеличилось, по сравне­нию с крысами Вистар, относительное содержание ЛФЛ (от 4±1% до 8±1%) (рис. 11). У крыс линии SHR наблюдается процентное уменьшение фосфолипи­дов наружного слоя мембраны – СМ и ФХ и относительное увеличение содер­жания ФЭА и ФС (рис. 12).
У крыс с артериальной гипертензией, получавших в течение 10 суток ЭЛС в дозе 150 мг/кг ежедневно, содержание дискоцитов в периферической крови составило 85,90±0,49%, что достоверно выше, чем в контрольной группе и не отличается от значений у крыс Вистар (табл. 108). Количество переходных форм в опытной группе было достоверно ниже значений как в контрольной группе, так и в группе у крыс Вистар. Следует отметить, что у животных, полу­чавших ЭЛС, дискоциты в виде эллипсов или отсутствовали или наблюдались в единичных случаях. Количество клеток в виде плоского диска, дискоцитов с выростом и дискоцитов с множественными выростами было достоверно ниже, чем в контроле. Среди эритроцитов предгемолитической формы количество ку­полообразных, по сравнению с контролем, статистически значимо не измени­лось, а доля клеток сферической формы и в виде спущенного мяча достоверно снизилась. Однако общее количество предгемолитических форм (2,63±0,12%) значимо не различалось в контрольной и опытной группах. Использование экс­тракта препятствовало росту числа эритроцитов дегенеративной формы. Так, их доля в опытной группе составила 0,47±0,08%, что в 2,6 раза ниже, чем в кон­трольной группе (табл. 108).
При курсовом введении ЭЛС крысам с артериальной гипертензией содер­жание белка составило 4,06±0,53 мг/мл суспензии теней эритроцитов, что дос­товерно не отличается от контроля (табл. 109). Наблюдалось повышение коли­чества липидов до 1,49±0,05 мг/мг белка, что статистически значимо превосхо­дит аналогичную величину в контрольной группе. Общее количество фосфоли- пидов достоверно возрастало по сравнению с контролем до 0,73±0,04 мг/мг белка. Соотношение холестерин/фосфолипиды составило 1,04±0,03, что досто­верно ниже, чем у животных контрольной группы и не отличается от значений у крыс линии Вистар. Количество ФЭА, ФХ и ФС у крыс, получавших ЭЛС, достоверно не отличалось от значений у контрольных животных (табл. 110). Содержание СМ составило 0,095±0,009 мг/мг белка, что выше, чем в контроль­ной группе и не отличается от значений у крыс Вистар. Количество ЛФЛ, под влиянием ЭЛС снижалось на 10% в сравнении с контролем, однако эти разли­чия не достигали уровня статистической значимости. Процентное соотношение массовых долей различных фосфолипидных фракций у животных, получавших ЭЛС, статистически значимо не отличалось от аналогичных показателей в кон­трольной группе (рис. 11). Использование ЭЛС у крыс линии 8НЯ приводило к частичному восстановлению процентного содержания фосфолипидов наружно­го слоя мембраны – СМ и ФХ (рис. 12).
Таким образом, курсовое применение ЭЛС у спонтанно-гипертензивных крыс препятствовало накоплению в кровеносном русле предгемолитических и дегенеративных форм эритроцитов, а также оказывало положительное воздей­ствие на липидный состав мембран красных клеток.

Таблица 108

Влияние курсового (14 дней) внутрижелудочного введения экстракта левзей сафлоровидной (ЭЛС) в дозе 150 мг/кг на структуру популяции эритроцитов (в %) по особенностям их поверхностной архитектоники у крыс линии SHR (по данным сканирующей электронной микроскопии)

Группа Вистар (интактные) SHR
Контроль ЭЛС (опыт)
Дискоциты
* 85,03±0Д5 80,60±0,24* 85,90±0,49+
Переходные формы Эллипсы 0,33±0,04 0,86±0,04* 0,00±0,00*+
Плоские диски 5,18±0Д9 6,04±0ДЗ* 4,80±0,32+
Дискоциты с вы­ростом 4,97±0Д2 5,60±0Д8* 4,32±0Д5*+
Дискоциты с гребнем 1,81±0,07 2,29±0Д2* 1,77±0,20
Дискоциты с
множественными
выростами 0,42±0,03 0,39±0,04 0Д0±0,03*+
Эритроциты в виде тутовой ягоды 0,05±0,02 0,03±0,02 0,02±0,02
Всего 12,76±0Д2 15,21±0Д0* 11,00±0,34*+
Предгемолитические формы Куполообразные эритроциты 0,55±0,07 1,54±0Д0* 1,82±0,06*
Сферические эритроциты 0,71±0,06 0,95±0,03* 0,70±0,07+
Эритроциты в виде спущенного мяча 0,36±0,06 0,50±0,03* 0Д2±0,03*+
Всего 1,62±0Д0 2,99±0Д4* 2,63±0Д2*
Дегенеративные формы 0,56±0,07 1,21±0,07* 0,47±0,08+

Таблица 109

Влияние курсового (14 дней) внутрижелудочного введения экстракта левзеи сафлоровидной (ЭЛС) в дозе 150 мг/кг на содержание в мембранах эритроцитов белка (в мг/мл суспензии теней эритроцитов), общих липидов (в мг/мг белка), общих фосфолипидов (в мг/мг белка), холестерина (мг/мг белка) и отношение холестерин/фосфолипиды у крыс линии БЫК.

Показатели Вистар
Контроль ЭЛС (опыт)
Белок 4,14±0,49 4,00±0,58 4,06±0,53
Общие липиды 1,97±0,10 1,29±0,040* 1,49±0,05*+
Общие фосфолипиды 0,96±0,05 0,59±0,03* 0,73±0,04*+
Холестерин 1,01±0,08 0,70±0,05* 0,76±0,08
Холестерин/Фосфолипиды 1,05±0,11 1,19±0,03* 1,04±0,03*

Примечание: * – р<0,05 в сравнении с интактными животными; + – р<0,05 в сравнении с контролем

Таблица 110

Влияние курсового (14 дней) внутрижелудочного введения экстракта левзеи сафлоровидной (ЭЛС) в дозе 150 мг/кг на содержание в мембранах эритроцитов (в мг/мг белка) фосфатидилэтаноламина (ФЭА), фосфатидилсерина (ФС), фос- фатидилхолина (ФХ), сфингомиелина (СМ) и лизофосфолипидов (ЛФЛ) у крыс линии БНЯ

Показатели Вистар 8НЯ
Контроль ЭЛС (опыт)
ФЭА 0,226±0,024 0,180±0,018 0,229±0,024
ФС 0,231±0,015 0,181±0,017 0,220±0,025
ФХ 0,354±0,020 0,110±0,018* 0,143±0,018*
СМ 0,110±0,008 0,067±0,004* 0,095±0,009+
ЛФЛ 0,039±0,002 0,049±0,004 0,044±0,005
Интактные
б%
□ ФЭА
ШФС
ШФХ

БНЯ + ЭЛС
нем
®ЛФЛ
Рис. 11. Влияние курсового (14 дней) внутрижелудочного введения экстракта левзей сафлоровидной (ЭЛС) в дозе 150 мг/кг на соотношение фосфолипидных фракций в мембранах эритроцитов у крыс линии 8НЯ.□ Фосфатидилсерин ОСфин го миелин
ШФосфатидилэтаноламин □ Фосфатидилхолин

Интактные Контроль ЭЛС
100%
Наружный слой
80%

Внутренний слой
60%
40%
20%
0%

Рис. 12. Влияние курсового (14 дней) внутрижелудочного введения экстракта левзей сафлоровидной (ЭЛС) в дозе 150 мг/кг на соотношение фосфолипидов внутреннего и наружного слоя в мембранах эритроцитов у крыс линии SHR

4.6.1.4.
Влияние экстракта левзеи сафлоровидной
на структурно- метаболическое состояние эритроцитов
в условиях модели
стрептозотоцин- индуцированного диабета

У крыс со стрептозотоцин-индуцированным диабетом содержание белка в мембранах составило 4,68±0,19 мг/мл суспензии теней эритроцитов, что не от­личалось от аналогичного показателя у интактных животных. Наблюдалось до­стоверное снижение содержания липидов в тенях эритроцитарных мембран до 1,41±0,07 мг/мг белка. Общее количество фосфолипидов составило 0,71±0,04 мг/мг белка, что на 32% ниже, чем у интактных крыс (табл. 111). У крыс со стрептозотоцин-индуцированным диабетом на фоне снижения общего количе­ства фосфолипидов отмечено снижение и абсолютного содержания холестери­на. Соотношение холестерин/фосфолипиды достоверно не отличалось от значе­ний интактных животных (табл. 111). У крыс со стрептозотоцин- индуцированным диабетом происходило снижение всего спектра фосфолипи­дов в мембранах эритроцитов, однако максимальным было снижение, по срав­нению с интактными значениями, содержания ФХ (до 0,177±0,010 мг/мг белка) и ФС (до 0,096±0,004 мг/мг белка) (табл. 112). В эритроцитарных мембранах крыс со стрептозотоцин-индуцированным диабетом увеличилось содержание фракции лизофосфолипидов до 0,112±0,006 мг/мг белка (табл. 112). При стреп- тозотоцин-индуцированном диабете произошло изменение соотношения мем­бранных фосфолипидов – значительно снизилось процентное содержание ФЭА (с 21% у интактных животных до 15% в контроле), ФС (с 21% у интактных жи­вотных до 13% в контроле). Существенно увеличилось, по сравнению с интакт­ными значениями, относительное содержание ЛФЛ (от 7±1% до 16±1%) (рис. 13). На модели стрептозотоцин-индуцированного диабета произошло измене­ние соотношений фосфолипидов наружного и внутреннего слоя мембран эрит­роцитов. Так, происходило снижение процентного содержания фосфолипидов внутреннего слоя мембраны – ФЭА и ФС; в наружном слое – снизилось про­центное содержание ФХ, с одновременным повышением доли СМ (рис. 14).
Содержание белка у крыс со стрептозотоцин-индуцированным диабетом, получавших ЭЛС составило 4,73±0,12 мг/мл суспензии эритроцитов. Содержа­ние общих липидов возросло на 14%, однако эти различия имели характер тен­денции. Уровень общих липидов у животных со стрептозотоцин- индуцированным диабетом, получавших ЭЛС не отличался от значений ин- тактных животных (табл. 111). Курсовое применение ЭЛС привело к возраста­нию общего содержания фосфолипидов на 38% (с 0,71±0,04 в контроле до 0,98±0,06 в опытной группе) (табл. 111). Содержание ФЭА при курсовом при­менении ЭЛС при стрептозотоцин-индуцированном диабете составило 0,191±0,015 мг/мг белка, что не отличалось от значений в интактной группе. Содержание ФС, ФХ и СМ увеличивалось на 58%, 32% и 27% при использова­нии ЭЛС в сравнении с контрольными значениями (табл. 111). Курсовое при­менение ЭЛС оказывало положительное влияние на соотношение различных фосфолипидов в мембранах эритроцитов. Так, повышалась процентная доля фосфолипидов, составляющих внутренний слой биомембран – ФЭА и ФС, снижалась доля лизофосфолипидов до 13% (при 16% в контроле) (рис. 13). В результате соотношение фосфолипидов внутреннего и наружного слоев мем­браны эритроцитов восстанавливалось до значений близких к интактным жи­вотным (рис. 14).
В отдельной серии экспериментов проведена оценка влияния ЭЛС на пока­затели перекисного окисления липидов в мембранах эритроцитов на модели стрептозотоцин-индуцированного диабета.
Уровень диеновых конъюгатов (ДК) у интактных крыс-самцов Вистар со­ставил 0,118±0,021 ОП2зз/мг липидов. Содержание малонового диальдегида (МДА) было 5,47±0,56 нМ/мг липидов. При индукции процессов ПОЛ с помощью Бе количество МДА возрастало до 12,19±1,86 нМ/мг липидов (табл. 113).
К 14-м суткам после введения стрептозотоцина количество ДК в мембра­нах эритроцитов составило 0,316±0,025 ОП2зз/мг липидов и достоверно превы­шало значения в интактной группе. Наблюдалось значительное повышение со­держания МДА до 8,47±0,46 нМ/мг липидов, что почти в 1,6 раза превысило значение МДА у интактных животных. При индукции ПОЛ сульфатом железа количество МДА возрастало до 21,16±2,99 нМ/мг липидов, что достоверно от­личалось от аналогичного показателя в группе интактных животных (табл. 113).
В группах животных, получавших ЭЛС, значительно снижался уровень ДК до 0,204±0,037, что достоверно ниже значений в контрольной группе. МДА как спонтанный, так и стимулированный снижался под влиянием ЭЛС в 2 раза и на 27% соответственно. Значения МДА в группе животных, получавших ЭЛС дос­товерно не отличались от интактных значений (табл. 113).
ЭЛС при курсовом применении в условиях моделей сердечно-сосудистых и эндокринных расстройств способен эффективно ограничивать процессы, ве­дущие к потере эритроцитами дискоидной формы и накоплению в перифериче­ской крови дегенеративных и предгемолитических форм клеток. Положитель­ное влияние ЭЛС на поверхностную архитектонику эритроцитов обеспечивает­ся восстановлением липидного спектра мембран красных клеток, нормализаци­ей соотношений различных фосфолипидов в наружной и внутренней части биомембраны, ограничением роста лизофосфолипидов и холестерина. Одним из механизмов защитного действия исследуемого препарата на липидный со­став мембран красных клеток является снижение интенсивности процессов пе- рекисного окисления липидов.Таблица 111
Влияние курсового (14 дней) внутрижелудочного введения экстракта левзеи сафлоровидной (ЭЛС) в дозе 150 мг/кг на содержание в мембранах эритроцитов белка (в мг/мл суспензии теней эритроцитов), общих липидов (в мг/мг белка), общих фосфолипидов (в мг/мг белка), холестерина (мг/мг белка) и отношение холестерин/фосфолипиды у крыс со стрептозотоцин-индуцированным диабе­том

Показатели Интактные животные Диабет
Контроль ЭЛС (опыт)
Белок 4,63±0,35 4,68±0,19 4,73±0,12
Общие липиды 2,10±0,18 1,41±0,07* 1,61±0,09
Общие фосфолипиды 1,04±0,14 0,71±0,04* 0,98±0,06+
Холестерин 1,06±0,12 0,70±0,10* 0,63±0,14
Холестерин/Фосфолипиды 1,02±0,16 0,99±0,15 0,64±0,12

Примечание: * – р<0,05 в сравнении с интактными животными; + – р<0,05 в сравнении с контролем
Таблица 112
Влияние курсового (14 дней) внутрижелудочного введения экстракта левзеи сафлоровидной (ЭЛС) в дозе 150 мг/кг на содержание в мембранах эритроцитов (в мг/мг белка) фосфатидилэтаноламина (ФЭА), фосфатидилсерина (ФС), фос- фатидилхолина (ФХ), сфингомиелина (СМ) и лизофосфолипидов (ЛФЛ) у крыс со стрептозотоцин-индуцированным диабетом

Показатели Интактные животные Диабет
Контроль ЭЛС (опыт)
ФЭА 0,216±0,015 0,109±0,006* 0,191±0,015+
ФС 0,220±0,008 0,096±0,004* 0,152±0,009*+
ФХ 0,342±0,011 0,177±0,010* 0,234±0,018*+
СМ 0,188±0,014 0,220±0,011* 0,280±0,019*+
4 ЛФЛ 0,074±0,007 0,112±0,006* 0,123±0,005*
Примечание: * – р<0,05 в сравнении с интактными животными; + – р<0,05 в

16%
15%
31%
13%
Сахарный диабет

18%
21%
Интактные

13%
28%
16%
Сахарный диабет + ЭЛС
Рис. 13. Влияние курсового (14 дней) внутрижелудочного введения экстракта левзей сафлоровидной (ЭЛС) в дозе 150 мг/кг на соотношение фосфолипидных фракций в мембранах эритроцитов у крыс со стрептозотоцин-индуцированным диабетом.
□ ФЭА
РФС
ОШФХ
нем кало/і

4.6.2.
Влияние экстракта лихниса хальцедонского
на структурно- метаболическое состояние эритроцитов
в условиях моделей
сердечно­сосудистых и эндокринных расстройств

4.6.2.1.
Влияние экстракта лихниса хальцедонского
на структурно- метаболическое состояние эритроцитов
в условиях модели
ишемии головного мозга

У крыс с ишемией головного мозга, получавших в течение 5 дней экстракт лихниса хальцедонского (ЭЛХ) в дозе 150 мг/кг количество дискоцитов не от­личалось от значений в контрольной группе и было достоверно снижено по сравнению с показателем у интактных животных (табл. 114). Число переходных форм составило 13,25±0,20%, что значимо не отличается от контроля и от зна­чений в интактной группе. Вместе с тем, следует отметить, что соотношение различных типов клеток принадлежащих к данной группе было отличным как от контроля, так и от интактных значений. Так, в группе животных, получав­ших ЭЛХ количество дискоцитов с гребнем и с множественными выростами было достоверно более низким, чем у контрольных и у интактных животных (табл. 114). С другой стороны, число клеток в виде эллипса и дискоцитов с оди­ночным выростом превосходило контрольные значения. Среди эритроцитов с предгемолитической формой, по сравнению с контролем, возрастала доля ку­полообразных (в 1,6 раза) и сферических клеток (в 3,2 раза); снижалась (в 1,6 раза) доля клеток в виде спущенного мяча. Однако, общее количество эритро­цитов предгемолитической формы в опытной группе превосходило контроль­ные значения. У леченных животных количество дегенеративно измененных эритроцитов было достоверно меньшим, чем в контроле, и не различалось со значениями в интактной группе (табл. 114).
При курсовом введении ЭЛХ в условиях модели ишемии головного мозга содержание белка в мембранах составило 4,25±0,31 мг/мл суспензии теней эритроцитов, что достоверно не отличается ни от контроля, ни от интактной группы (табл. 115). Количество липидов и фосфолипидов возрастало, по срав­нению с контролем, на 10% и 15% соответственно, однако эти изменения не до­стигали необходимого уровня статистической значимости. Соотношение холе- стерин/фосфолипиды составило 1,07±0,08, что свидетельствует об однонаправ­ленном изменении содержания в эритроцитарных мембранах как количества холестерина, так и фосфолипидной фракции. Количество ФХ у крыс, получав­ших ЭЛХ, составило 0,202±0,019 мг/мг белка, что достоверно выше значений в контрольной группе (табл. 116). Содержание ФЭА и ФС значимо не различа­лось с контролем, однако не было также достоверных различий и со значения­ми этих показателей у интактных животных. Количество СМ достигало 0,086±0,009 мг/мг белка и превосходило значения в контрольной группе. Со­держание лизофосфолипидов в контрольной и опытной группах значимо не различалось (табл. 116). Процентное соотношение массовых долей ФС, СМ и ЛФЛ у животных, получавших ЭЛС, соответствовало аналогичным показате­лям в контрольной группе (рис. 15). Достоверно, по сравнению с контролем, возрастала доля ФХ и снижалась ФЭА. Применение ЭЛХ у животных с ишеми­ей головного мозга способствовало восстановлению фосфолипидов наружного слоя мембраны эритроцита – ФХ и СМ (рис. 16).
Таким образом, курсовое применение ЭЛХ у крыс с ишемией головного мозга препятствует процессам деградации эритроцитов, за счет положительно­го влияния на липидный спектр мембран красных клеток крови.Таблица 114
Влияние курсового (5 дней) внутрижелудочного введения экстракта лихниса хальцедонского (ЭЛХ) в дозе 150 мг/кг на структуру популяции эритроцитов по особенностям их поверхностной архитектоники у крыс с ишемией головного мозга (по данным сканирующей электронной микроскопии)

Группа Интактные животные Ишемия головного мозга
Контроль ЭЛХ (опыт)
Дискоциты 85,03±0,15 83,35±0,16* 83,55±0,30*
Переходные формы Эллипсы 0,33±0,04 0,36±0,04 0,62±0,07*+
Плоские диски 5,18±0,19 5,91±0,21* 5,30±0,13
Дискоциты с вы­ростом 4,97±0,12 4,60±0,18 5,52±0,11*+
Дискоциты с гребнем 1,81±0,07 2,21±0,07* 1,55±0,06*+
Дискоциты с
множественными
выростами 0,42±0,03 0,43±0,04 0,12±0,02*+
Эритроциты в ви­де тутовой ягоды 0,05±0,02 0,08±0,03 0,15±0,04*
Всего 12,76±0,12 13,70±0,22* 13,25±0,20
Предгемолитические фор­мы Куполообразные эритроциты 0,55±0,07 0,68±0,04 1,07±0,06*+
Сферические эритроциты 0,71±0,06 0,30±0,05* 0,97±0,04*+
Эритроциты в ви­де спущенного мяча 0,36±0,06 1,10±0,03* 0,67±0,10*+
Всего 1,62±0,10 2,08±0,10* 2,70±0,15*+
Дегенеративные формы 0,56±0,07 0,86±0,07* 0,50±0,04+

Таблица 115

Влияние курсового (5 дней) внутрижелудочного введения экстракта лихниса хальцедонского (ЭЛХ) в дозе 150 мг/кг на содержание в мембранах эритроци­тов белка (в мг/мл суспензии теней эритроцитов), общих липидов (в мг/мг бел­ка), общих фосфолипидов (в мг/мг белка), холестерина (мг/мг белка) и отноше­ние холестерин/фосфолипиды у крыс с ишемией головного мозга

Показатели Интактные животные Ишемия головного мозга
Контроль ЭЛХ (опыт)
Белок 4,14±0,49 3,97±0,58 4,25±0,31
Общие липиды 1,97±0,10 1,36±0,08* 1,49±0,05*
Общие фосфолипиды 0,96±0,05 0,63±0,02* 0,72±0,05*
Холестерин 1,01±0,08 0,73±0,04* 0,77±0,08
Холестерин/Фосфолипиды 1,05±0,11 1,16±0,07 1,07±0,08
Примечание: * – р<0,05 в сравнении с интактными животными

Таблица 116

Влияние курсового (5 дней) внутрижелудочного введения экстракта лихниса хальцедонского (ЭЛХ) в дозе 150 мг/кг на содержание в мембранах эритроци­тов (в мг/мг белка) фосфатидилэтаноламина (ФЭА), фосфатидилсерина (ФС), фосфатидилхолина (ФХ), сфингомиелина (СМ) и лизофосфолипидов (ЛФЛ) у крыс с ишемией головного мозга

Показатели Интактные животные Ишемия головного мозга
Контроль ЭЛХ (опыт)
ФЭА 0,226±0,024 0,204±0,015 0,196±0,015
ФС 0,231±0,015 0,176±0,012* 0,189±0,023
ФХ
* 0,354±0,020 0,140±0,011* 0,202±0,019*+
СМ 0,110±0,008 0,057±0,002* 0,086±0,009*+
ЛФЛ 0,039±0,002 0,052±0,003* 0,049±0,002*

Интактные
Ишемия головного мозга

7%

Ишемия головного мозга + ЭЛХ
□ ФЭА
ФХ
ЛФЛ
Рис. 15. Влияние курсового (5 дней) внутрижелудочного введения экстракта лихниса хальцедонского (ЭЛХ) в дозе 150 мг/кг на соотношение фосфолипид- ных фракций в мембранах эритроцитов у крыс с ишемией головного мозга.

4.6.2.2.
Влияние экстракта лихниса халыдедонского
на структурно- метаболическое состояние эритроцитов
в условиях модели
инфаркта миокарда

При курсовом введении ЭЛХ крысам с инфарктом миокарда количество дискоцитов составило 83,32±0,31%, что достоверно выше по сравнению с ана­логичным показателем контрольной группы животных (табл. 117). Число пере­ходных форм у крыс, получавших ЭЛХ, было достоверно ниже, чем в контроле. Снижение количества эритроцитов с переходной формой происходило за счет достоверного уменьшения доли клеток в виде эллипса (в 1,7 раза), дискоцитов с выростом (в 1,1 раза) и с множественными выростами (в 7,7 раза). Под дейст­вием ЭЛХ достоверно снижалось (до 2,73±0,10%) количество предгемолитиче- ских форм эритроцитов. Среди них доля куполообразных эритроцитов умень­шилась в 1,2 раза, сферических эритроцитов – в 1,2 раза. Количество эритроци­тов в виде спущенного мяча достоверно не отличалось от контрольных значе­ний, однако также не было различий и с интактной группой. Количество деге­неративно измененных эритроцитов у крыс, получавших ЭЛХ, было достовер­но диже, чем в контроле и не отличалось от значений у интактных животных (табл. 117).
У крыс с инфарктом миокарда, получавших ЭЛХ, содержание белка в мембранах составило 3,79±0,31 мг/мл суспензии теней эритроцитов, что досто­верно не отличается ни от интактной группы, ни от контроля (табл. 118). Общее количество липидов составило 1,55±0,09 мг/мг белка и статистически значимо не отличалось от величин в контрольной группе. Содержание фосфолипидной фракции, по сравнению с контролем, возрастало (до 0,81±0,07 мг/мг белка), од­нако изменение данного показателя не достигало необходимого уровня стати­стической значимости, вместе с тем не было достоверных различий и от соот­ветствующих значений в группе интактных животных. Соотношение холесте- рин/фосфолипиды составило 0,91±0,11, что не отличается от значений кон­трольной и интактной групп (табл. 118). Количество ФЭА и ФХ у крыс, полу­чавших ЭЛХ, составило соответственно 0,209±0,015 мг/мг белка и 0,178±0,019 мг/мг белка и достоверно не отличалось от значений в контрольной группе (табл. 119). Содержание ФС и СМ статистически значимо возрастало по срав­нению с контрольными животными на 22% и 59% соответственно. Курсовое введение ЭЛХ достоверно снижало содержание ЛФЛ на 33% в мембранах эрит­роцитов крыс с инфарктом миокарда. У крыс, получавших ЭЛХ, достоверно снизилось, процентное содержание ФХ и ЛФЛ и возросла относительная доля СМ в сравнении с контрольными значениями (рис. 17). Применение ЭЛХ у крыс с инфарктом миокарда не оказывало статистически значимого влияния на соотношение фосфолипидов наружного и внутреннего слоя мембраны в срав­нении с контролем (рис. 18).
Таким образом, курсовое применение ЭЛХ у крыс с инфарктом миокарда способствовало снижению дегенеративных изменений эритроцитов перифери­ческой крови за счет положительного воздействия на липидный состав мембран красных клеток.

Таблица 117

Влияние курсового (5 дней) внутрижелудочного введения экстракта лихниса хальцедонского (ЭЛХ) в дозе 150 мг/кг на структуру популяции эритроцитов (в %) *по особенностям их поверхностной архитектоники у крыс с инфарктом мио­карда (по данным сканирующей электронной микроскопии)

Группа Интактные животные Инфаркт миокарда
Контроль ЭЛХ (опыт)
Дискоциты 85,03±0Д5 80,36±0,29* 83,32±0,31*+
Переходные формы Эллипсы 0,33±0,04 0,88±0Д0* 0,53±0,04*+
Плоские диски 5Д8±0Д9 5,64±0,21 5,22±0,08
Дискоциты с вы­ростом 4,97±0Д2 5,94±0,08* 5,40±0Д5+
Дискоциты с гребнем 1,81±0,07 2,00±0,07 2,00±0,04
Дискоциты с
множественными
выростами 0,42±0,03 1,00±0ДЗ* 0ДЗ±0,02*+
Эритроциты в ви­де тутовой ягоды 0,05±0,02 0Д0±0,01* 0,08±0,02
Всего 12,76±0,12 15,56±0,24* 13,37±0,20*+
Предгемолитические фор­мы Куполообразные эритроциты 0,55±0,07 1,30±0,05* 1Д0±0,04*+
Сферические эритроциты 0,71±0,06 1,34±0,04* 1,08±0,03*+
Эритроциты в ви­де спущенного мяча 0,36±0,06 0,70±0,05* 0,55±0,08
Всего 1,62±0Д0 3,34±0Д0* 2,73±0Д0*+
Дегенеративные формы 0,56±0,07 0,79±0,04* 0,58±0,03+

Таблица 118

Влияние курсового (5 дней) внутрижелудочного введения экстракта лихниса хальцедонского (ЭЛХ) в дозе 150 мг/кг на содержание в мембранах эритроци­тов белка (в мг/мл суспензии теней эритроцитов), общих липидов (в мг/мг бел­ка), общих фосфолипидов (в мг/мг белка), холестерина (мг/мг белка) и отноше­ние холестерин/фосфолипиды у крыс с инфарктом миокарда

Показатели Интактные животные Инфаркт миокарда
Контроль ЭЛХ (опыт)
Белок 4,14±0,49 4,34±0,49 3,97±0,31
Общие липиды 1,97±0,10 1,36±0,08* 1,55±0,09*
Общие фосфолипиды 0,96±0,05 0,75±0,02* 0,81±0,07
Холестерин 1,01±0,08 0,61±0,03* 0,74±0,09
Хелестерин/Фосфолипиды 1,05±0,11 0,81±0,06 0,91±0,11
Примечание: * – р<0,05 в сравнении с интактными животными

Таблица 119

Влияние курсового (5 дней) внутрижелудочного введения экстракта лихниса хальцедонского (ЭЛХ) в дозе 150 мг/кг на содержание в мембранах эритроци­тов (в мг/мг белка) фосфатидилэтаноламина (ФЭА), фосфатидилсерина (ФС), фосфатидилхолина (ФХ), сфингомиелина (СМ) и лизофосфолипидов (ЛФЛ) у крыс с инфарктом миокарда

Показатели Интактные животные Инфаркт миокарда
Контроль ЭЛХ (опыт)
ФЭА 0,226±0,024 0,202±0,015 0,209±0,015
ФС 0,231±0,015 0,211±0,008 0,258±0,011+
ФХ 0,354±0,020 0,201±0,019* 0,178±0,019*
СМ 0,110±0,008 0,081±0,007* 0,129±0,012+
ЛФЛ 0,039±0,002 0,048±0,003* 0,032±0,004+

15%
25%
27%

□ ФЭА ШФС 11ФХ
нем
Ш ЛФ/1

37%
Интактные
24%

27%\
27%
29%
Инфаркт миокарда
30%
Инфаркт миокарда + ЭЛХ
Рис. 17. Влияние курсового (5 дней) внутрижелудочного введения экстракта лихниса хальцедонского (ЭЛХ) в дозе 150 мг/кг на соотношение фосфолипид- ных фракций в мембранах эритроцитов у крыс с инфарктом миокарда■ Фосфатидилэтаноламин ЕЗФосфатидилсерин
□ Фосфатидилхолин □ С ф и нгом ие л и н
100% 80% –
»
60% – 40% 20% 0%

Наружный слой

■
Внутренний слой

Интактные Контроль ЭЛХ
Рис. 18. Влияние курсового (5 дней) внутрижелудочного введения экстракта лихниса хальцедонского (ЭЛХ) в дозе 150 мг/кг на соотношение фосфолипидов внутреннего и наружного слоя в мембранах эритроцитов у крыс с инфарктом миокарда.

4.6.2.3.
Влияние экстракта лихниса хальцедонского
на структурно- метаболическое состояние эритроцитов
в условиях модели
артериальной ги- пертензии

При курсовом введении ЭЛХ (150 мг/кг) количество дискоцитов у живот­ных линии SHR достоверно возрастало (до 82,73±0,34%) по сравнению с кон­трольной группой (табл. 120). Среди эритроцитов переходной формы доля кле­ток в виде эллипса, плоского диска и дискоцитов с выростом была достоверно ниже, чем в контроле и не отличалась от значений у нормотензивных крыс; ко­личество дискоцитов с множественными выростами возросло; число дискоци­тов с гребнем и эритроцитов в виде тутовой ягоды достоверно не различалось ни с контролем, ни с крысами Вистар. Общее количество эритроцитов с пере­ходной формой составило 13,22±0,24 % и было статистически значимо ниже, чем в контроле. Под действием ЭЛХ не изменялось содержание предгемолити- ческих и дегенеративно измененных форм эритроцитов.
При курсовом введении ЭЛХ крысам с артериальной гипертензией содер­жание белка составило 3,98±0,45 мг/мл суспензии теней эритроцитов и досто­верно не отличалось от контроля и от интактных значений (табл. 121). Количе­ство липидов (1,44±0,05 мг/мг белка) статистически значимо не отличалось от аналогичной величины в контрольной группе. Общее количество фосфолипи- дов достоверно возрастало по сравнению с контролем до 0,72±0,04 мг/мг белка. Соотношение холестерин/фосфолипиды составило 1,00±0,06, что значимо ни­же, чем у животных контрольной группы (1,18±0,03) и не отличается от значе­ний у крыс Вистар. Количество ФЭА, ФС и СМ у крыс, получавших ЭЛХ, дос­товерно не отличалось от значений у контрольных животных (табл. 122). Со­держание ФХ составило 0,209±0,019 мг/мг белка, что статистически значимо выше, чем в контрольной группе. При курсовом введении ЭЛХ у гипертензив- ных животных наблюдалось достоверное снижение количества ЛФЛ (до 0,032±0,004 мг/мг белка). Процентное соотношение массовых долей ФЭА и СМ в мембранах эритроцитов крыс контрольной и опытной групп не различалось (рис. 19). У крыс SHR, получавших исследуемый экстракт, возрастала, по сравнению с контрольными животными, относительная доля ФХ и снижалась в два «
раза доля ЛФЛ, причем процент ЛФЛ у леченных животных линии БНЯ не раз­личался со значениями интактных животных (рис. 19). Курсовое применение ЭЛХ способствовало восстановлению процентного содержания ФХ – компо­нента наружного слоя мембраны эритроцита (рис. 20).
Таким образом, курсовое применение ЭЛХ у спонтанно-гипертензивных крыс препятствовало накоплению в кровеносном русле предгемолитических и дегенеративных форм эритроцитов, а также оказывало положительное воздей­ствие на липидный состав мембран красных клеток.Таблица 120
Влияние курсового (10 дней) внутрижелудочного введения экстракта лихниса хальцедонского (ЭЛХ) в дозе 150 мг/кг на структуру популяции эритроцитов (в %),по особенностям их поверхностной архитектоники у крыс линии SHR (по данным сканирующей электронной микроскопии)

Группа Вистар (интактные) SHR
Контроль ЭЛХ (опыт)
Дискоциты 85,03±0,15 80,60±0,24* 82,73±0,34*+
Переходные формы Эллипсы 0,33±0,04 0,86±0,04* 0,48±0,05+
Плоские диски 5,18±0,19 6,04±0,13* 5,52±0,13+
Дискоциты с вы­ростом 4,97±0,12 5,60±0,18* 4,65±0,15+
Дискоциты с гребнем 1,81±0,07 2,29±0,12* 1,97±0,08
Дискоциты с
множественными
выростами 0,42±0,03 0,39±0,04 0,52±0,03+
Эритроциты в ви­де тутовой ягоды 0,05±0,02 0,03±0,02 0,08±0,02
Всего 12,76±0,12 15,21±0,10* 13,22±0,24*+
Предгемолитические формы
1 Куполообразные эритроциты 0,55±0,07 1,54±0,10* 0,90±0,06*+
Сферические эритроциты 0,71±0,06 0,95±0,03* 0,55±0,04+
Эритроциты в ви­де спущенного мяча 0,36±0,06 0,50±0,03* 1,55±0,08*+
Всего 1,62±0,10 2,99±0,14* 3,00±0,16*
Дегенеративные формы 0,56±0,07 1,21±0,07* 1,15±0,06*

Таблица 121

Влияние курсового (14 дней ежедневно внутрижелудочно) введения экстракта лихниса хальцедонского (ЭЛХ) (150 мг/кг) на содержание в мембранах эритро­цитов белка (в мг/мл суспензии теней эритроцитов), общих липидов (в мг/мг белка), общих фосфолипидов (в мг/мг белка), холестерина (мг/мг белка) и от­ношение холестерин/фосфолипиды у крыс линии SHR

Показатели Вистар SHR
Контроль ЭЛХ (опыт)
Белок 4,14±0,49 4,00±0,58 3,98±0,45
Общие липиды 1,97±0,10 1,29±0,04* 1,44±0,05*
Общие фосфолипиды 0,96±0,05 0,59±0,03* 0,72±0,04*+
Холестерин 1,01±0,08 0,70±0,05* 0,72±0,07
Холестерин/Фосфолипиды 1,05±0,11 1,18±0,03 1,00±0,06+

Примечание: * – р<0,05 в сравнении с интактными животными; + – р<0,05 в сравнении с контролем

Таблица 122

Влияние курсового (14 дней ежедневно внутрижелудочно) введения экстракта лихниса хальцедонского (ЭЛХ) (150 мг/кг) на содержание в мембранах эритро­цитов (в мг/мг белка) фосфатидилэтаноламина (ФЭА), фосфатидилсерина (ФС), фосфатидилхолина (ФХ), сфингомиелина (СМ) и лизофосфосолипидов (ЛФЛ) у крыс линии SHR

Показатели Вистар SHR
Контроль ЭЛХ (опыт)
ФЭА 0,226±0,024 0,180±0,018 0,222±0,014
ФС
* 0,231±0,015 0,181±0,017 0,189±0,023
ФХ 0,354±0,020 0,110±0,018* 0,209±0,019*+
СМ 0,110±0,008 0,067±0,004* 0,071±0,011*
ЛФЛ 0,039±0,002 0,049±0,004 0,032±0,004+
Рис. 19. Влияние курсового (14 дней) внутрижелудочного введения экстракта лихниса хальцедонского (ЭЛХ) в дозе 150 мг/кг на соотношение фосфолипид- ных фракций в мембранах эритроцитов у крыс линии ЭНЯ

ШФосфатидилэтаноламин □ Фосфатидилхолин
* □ Фосфатидилсерин
□ Сфин го миелин
100%

80% Наружный слой
60%

40% Внутренний слой

20% – П%
Интактные Контроль ЭЛХ

Рис. 20. Влияние курсового (10 дней) внутрижелудочного введения экстракта лихниса хальцедонского (ЭЛХ) в дозе 150 мг/кг на соотношение фосфолипидов внутреннего и наружного слоя в мембранах эритроцитов у крыс линии SHR

4.6.2.4.
Влияние экстракта лихниса хальцедонского
на структурно- метаболическое состояние эритроцитов
в условиях модели
стрептозотоцин- индуцированного диабета

При стрептозотоцин-индуцированном диабете содержание белка в мем­бранах эритроцитов крыс, получавших ЭЛХ составило 4,61±0,16 мг/мл суспензии эритроцитов (табл. 123). Содержание общих липидов достоверно возросло на 30%. Курсовое применение ЭЛХ в дозе 150 мг/кг в течение 14 дней привело к достоверному возрастанию общего содержания фосфолипидов на 32% (с 0,71±0,04 в контроле до 0,94±0,05 в опытной группе). Уровень холестерина у животных со стрептозотоцин-индуцированным диабетом, получавших ЭЛХ, не отличался от контрольных значений (табл. 123). Содержание ФЭА при курсо­вом применении ЭЛС при стрептозотоцин-индуцированном диабете составило 0,219±0,012 мг/мг белка, что достоверно превосходит значение этого показате­ля в контроле и не отличается от данных в интактной группе (табл. 124). Со­держание ФС и СМ увеличивалось на 78% и 58% при использовании ЭЛХ в сравнении с контрольными значениями (табл. 124). Несмотря на то, что абсо­лютные значения содержания лизофосфолипидов были выше в группе живот­ных, получавших ЭЛХ, в процентном соотношении их содержание было досто­верно снижено в сравнении с контролем (рис. 21). Курсовое применение ЭЛС оказывало положительное влияние на соотношение различных фосфолипидов в мембранах эритроцитов. Так, повышалась процентная доля фосфолипидов, со­ставляющих внутренний слой биомембран – ФЭА и ФС, снижалась доля лизо­фосфолипидов до 13% (при 16% в контроле) (рис. 21). В результате соотношение фосфолипидов внутреннего и наружного слоем мембраны эритроцитов восстанавливалось до значений близких у интактных животных (рис. 22).
Выявленное в исследованиях повышение количества дискоцитов и сниже­ние числа переходных форм при курсовом применении ЭЛХ в условиях моде­лей сердечно-сосудистой и эндокринной патологии, свидетельствует о способ­ности ЭЛХ тормозить процессы, ведущие к потере эритроцитом нормальной дискоидной формы. Во многом данный эффект препарата обусловлен ограни­чением снижения содержания липидов в эритроцитарной мембране. Кроме того ЭЛХ способствует восстановлению нормального соотношения фосфолипидов внешнего и внутреннего слоев мембраны эритроцита, препятствует избыточно­му накоплению лизофосфолипидов и холестерина.
В отдельной серии экспериментов проведена оценка влияния ЭЛХ на по­казатели перекисного окисления липидов в условиях модели сахарного диабета.
В группах животных, получавших ЭЛХ значительно снижался уровень ДК до .0,232±0,028, что достоверно ниже значений в контрольной группе (табл. 125). Под влиянием ЭЛС спонтанный уровень МДА снижался в 2,1 раза, сти­мулированный уровень МДА снижался на 28%. Значения МДА в группе жи­вотных, получавших ЭЛХ достоверно не отличались от интактных значений (табл. 125).
Таким образом, у крыс с моделями сердечно-сосудистой патологии и са­харного диабета ЭЛС и ЭЛХ препятствуют снижению содержания общих ли­пидов, общих фосфолипидов и предотвращают избыточное накопление холе­стерина и лизифосфолипидов. Курсовое применение экстрактов экдистероид- содержащих растений на моделях сердечно-сосудистых расстройств и сахарно­го диабета способствует восстановлению соотношения компонентов фосфоли­пидов внутреннего и наружного слоя мембран эритроцитов. Одним из меха­низмов защитного действия ЭЛС и ЭЛХ на липидый состав мембран красных клеток является снижение интенсивности процессов перекисного окисления липидов. Указанные положительные эффекты ЭЛС и ЭЛХ в отношении липид- ного спектра мембран эритроцитов находят свое отражение в восстановлении параметров поверхностной архитектоники красных клеток, что проявляется снижением доли переходных, предгемолитических и дегенеративных форм и возрастанием количества дискоцитов.Таблица 123
Влияние курсового (14 дней) внутрижелудочного введения экстракта лихниса хальцедонского (ЭЛХ) в дозе 150 мг/кг на содержание в мембранах эритроци­тов белка (в мг/мл суспензии теней эритроцитов), общих липидов (в мг/мг бел­ка), общих фосфолипидов (в мг/мг белка), холестерина (мг/мг белка) и отноше­ние холестерин/фосфолипиды у крыс со стрептозотоцин-индуцированным диа­бетом

Показатели Интактные животные Диабет
Контроль ЭЛХ (опыт)
Белок 4,63±0,35 4,68±0,19 4,61±0,16
Общие липиды 2,10±0,18 1,41±0,07* 1,84±0,08*+
Общие фосфолипиды 1,04±0,14 0,71±0,04* 0,94±0,05*+
Холестерин 1,06±0,12 0,70±0,10 0,76±0,08
Холестерин/Фосфолипиды 1,02±0,16 0,99±0,15 0,70±0,06

Примечание: * – р<0,05 в сравнении с интактными животными; + – р<0,05 в сравнении с контролем
Таблица 124
Влияние курсового (14 дней) внутрижелуд очного введения экстракта лихниса хальцедонского (ЭЛХ) в дозе 150 мг/кг на содержание в мембранах эритроци­тов, (в мг/мг белка) фосфатидилэтаноламина (ФЭА), фосфатидилсерина (ФС), фосфатидилхолина (ФХ), сфингомиелина (СМ) и лизофосфолипидов (ЛФЛ) у крыс со стрептозотоцин-индуцированным диабетом

Показатели Интактные животные Диабет
Контроль ЭЛХ (опыт)
ФЭА 0,216±0,015 0,109±0,006* 0,219±0,012+
ФС 0,220±0,008 0,096±0,004* 0,171±0,004*+
ФХ 0,342±0,011 0,177±0,010* 0,200±0,023*
СМ 0,188±0,014 0,220±0,011* 0,348±0,013*+
ЛФЛ 0,074±0,007 0,112±0,006* 0,143±0,004*+

16%
15%
31%
13%
Сахарный диабет

13%
32%
16%
Сахарный диабет + ЭЛХ
Рис. 21. Влияние курсового (14 дней) внутрижелудочного введения экстракта лихниса хальцедонского (ЭЛХ) в дозе 150 мг/кг на соотношение фосфолипид- ных фракций в мембранах эритроцитов у крыс со стрептозотоцин- индуцированным диабетом.

18%
21%
Интактные

□ Фосфатидилсерин
□ Сфингомиелин
ШФосфатидилэтаноламин □ Фосфатидилхолин
100%
Наружный слой

Внутренний слой

80%
60%
40%
20%
0%
элх
Интактные Контроль
Рис. 22. Влияние курсового (14 дней) внутрижелудочного введения экстракта лихниса хальцедонского (ЭЛХ) в дозе 150 мг/кг на соотношение фосфолипидов внутреннего и наружного слоя в мембранах эритроцитов у крыс со стрептозо- тоцин-индуцированным диабетом.

Таблица 125

Влияние внутрижелудочного введения экстракта лихниса хальцедонского (ЭЛХ) в дозе 150 мг/кг в течение 14 дней на содержание диеновых конъюгатов (ДК, ОП2зз/мг липидов) и малонового диальдегида (МДА, нМ/мг липидов) до и после индукции перекисного окисления липидов в мембранах эритроцитов крыс со стрептозотоцин-индуцированным сахарным диабетом

Группы ДК МДА
До индукции После индукции
Интактные 0,118±0,021 5,47±0,56 12,19±1,86
Контроль 0,316±0,025* 8,47±0,46* 21,16±2,99*
ЭЛХ 0,232±0,028*+ 3,94±0,15+ 15,25±2,29+

Диссертация Васильева А.С. “Фармакологические эффекты экстрактов экдистероидсодержащих растений в условиях моделей синдрома повышенной вязкости крови”. Содержание.

Диссертация Васильева А.С. “Фармакологические эффекты экстрактов экдистероидсодержащих растений в условиях моделей синдрома повышенной вязкости крови”. Введение.1.

Диссертация Васильева А.С. “Фармакологические эффекты экстрактов экдистероидсодержащих растений в условиях моделей синдрома повышенной вязкости крови”. 2.

Диссертация Васильева А.С. “Фармакологические эффекты экстрактов экдистероидсодержащих растений в условиях моделей синдрома повышенной вязкости крови”. 3.

Диссертация Васильева А.С. “Фармакологические эффекты экстрактов экдистероидсодержащих растений в условиях моделей синдрома повышенной вязкости крови”. 4.1, 4.2, 4.3.

Диссертация Васильева А.С. “Фармакологические эффекты экстрактов экдистероидсодержащих растений в условиях моделей синдрома повышенной вязкости крови”. 4.4.

Диссертация Васильева А.С. “Фармакологические эффекты экстрактов экдистероидсодержащих растений в условиях моделей синдрома повышенной вязкости крови”. 4.5.

Диссертация Васильева А.С. “Фармакологические эффекты экстрактов экдистероидсодержащих растений в условиях моделей синдрома повышенной вязкости крови”. 4.6.

Диссертация Васильева А.С. “Фармакологические эффекты экстрактов экдистероидсодержащих растений в условиях моделей синдрома повышенной вязкости крови”. 5.

Диссертация Васильева А.С. “Фармакологические эффекты экстрактов экдистероидсодержащих растений в условиях моделей синдрома повышенной вязкости крови”. Выводы

Диссертация Васильева А.С. “Фармакологические эффекты экстрактов экдистероидсодержащих растений в условиях моделей синдрома повышенной вязкости крови”. Список литературы