Д.М. Гаджиева «Сравнительное изучение анаболизирующего и иммуностабилизирующего действия препаратов апилак и экдистен при физической нагрузке». Глава II.

МОСКОВСКИЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКИЙ
ЦЕНТР СПОРТИВНОЙ МЕДИЦИНЫ

Диссертация
на соискание ученной степени 

Автор:

ГАДЖИЕВА Д М.

СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ АНАБОЛИЗИРУЮЩЕГО
И ИММУНОСТАБИЛИЗИРУЮЩЕГО
ДЕЙСТВИЯ ПРЕПАРАТОВ АПИЛАК
И ЭКДИСТЕН ПРИ ФИЗИЧЕСКОЙ НАГРУЗКЕ

 

 

2.1.
Характеристика основных
использованных материалов
и препаратов

1. Препарат апилак – табл. для сублингвального применения, содержат 10 мг лиофилизированного ММ, производства Каунасского завода фармпрепаратов, Литва.
2. Препарат экдистен – табл. 5 мг, производства НИИ растительных препаратов АН Узбекистана.
3. Препарат метандростенолон – табл. 5 мг, РФ.
4. Препарат леветон – табл., содержащие 65 мг порошка корня левзеи, 330 мг цветочной пыльцы, 1 мг а-токоферола, 22 мг аскорбиновой кислоты, производства фирм «Биокор» и «Бифарм». РФ.
5. Препарат Synacten, производства фирмы <vCiba» (Швейцария), содржит кортикотропин 40 ЕД в амп., для вн\ гримышечною введения.
6. Стандартный набор реактивов «Clinical Assay» (США) для определения радиоиммунным методом содержания в крови кортизола.
7. Стандартные наборы реактивов фирмы «B^ringer» (ФРГ) для определения глюкозы, лактата и мочевины в биопробах
8. Моноспецифические сыворотки против отдельных иммуноглобулинов человека, производства Московского НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова.

Химические реактивы оісчес і венної о производства с классификацией ХЧ или ОСЧ. 2.2. Оборудование

1. Механический іребнои >ріомеір «Ciessine» ((MM ) 2 Спектрофлуориметр MPF-Ч фирмы «Hitachi» (Япония). ^ Установка ия проведения радна імюи имм\нодиффузии по Манчини
2. Гамма-счегчик «Scarle». модсп. І 1⁽>7 (СПІД). эффективность счеіа по І ” еосіавчя м S0°-n

^ Лабораюрныи медицинскии ана іимюр «Виш грон» (РФ). 6. Лабораторная центрифуга ЦЛК-І

К тиническиіі микроіаюанатіпагоп кропи «І schueiler Со» (ФРІ”) ^v К” іиническпи іам а і-ана ш u і or крови “Yellow Spnnu Instrument Co»(CHI\)

laóopa і op т.і и ik і ряхи па і e 11, і ipoo Л <ч ie\ (Re шкопри і лінія і Пі Ка.іипер ме ппіинскии ¹¹ Весы ме іиіпмк кие і: Ашропомеїр Марппіа

• Лабораторные животные

В жеперименш\ использованы бол,к- беспородные крысы самцы весом 200-230 г (всего 30 животных), содержащиеся в стандартных \с.’ювиях на обычной тою вивария

• Контингент обследованных спортсменов, организация эксперимента и врачебного контроля.

Оценку анаболиэирующей активности препаратов апилак и ждисюн, а кжже и\ влияния на фпш’кчьч’ рлбо тснособнос и. высококвалифицированных спорюмоноц 11 р»->тл(щ ы в жеперимен I альных [р\ппа\ добровольцев-гребцов I лк лломи’кч кля ;реГмя) с \ ровном квалификации о! кандидат в масюра спор1а (кме) до масюра спорт междч народного класса (мемк) в вофасю 01 ^ ло 25 ло!, всего 60

Влияние изученных преплрлюв НЛ КО 1ИЧИ!1\ резервных возможностей коры НЛДПОЧСЧНИКОВ И1\ЧЛ.Ш в жеперимен I аЛ1.!1МХ 1 р\ 11IIЛX Доброво 1Ы 10В V. пор I СМОНОМ. МЧ/ЬЧИ”¹ > 1Н^М1’|’ I III шрмошим В НИК ШЧОСКИХ видах споры ^ ПрО)1М\ПкЧ 1 венным прояв 1011И0М выносливости (академическая греб|я. н.ылые юнкп. кчкол юшческии 001 НЛ средние II л П1НШ.1С лис I ,11111141. I’ МВЛЧИО. Ки1М,Кобе>1\!1|,1И июр;>. раздельно \ епорюменот нижой квалификации (\чатпеся школы- ишернат спортивною профиля, 15-1″^ леи \ровеш. квалификации 2-!

разряд) и высококвалифицированных спорк’менов (1^-27 ici, уровень квалификации от кме до мемк). Веет на лом лапе работы привлекалось к участию в эксперимент 30 начинающих спортсменом lin ни\ h требцом. 10 лыжников. 5 бетунов (л/а). ^ пловцом м 4 конькобежца) и 30 высококвалифицированных спортсменом I и з них 12 i ребцов, 2 1ыжника, 4 бегуна (л/а), 6 пловцов и 6 конькобежцев). В пределах эксперимента в каждой экспериментальной группе (контрольной и опытных) соблюдалось постоянство состава \ частников по их спортивной с попил, ппаиип. т с сохраня нкь ihh юятк i во ^млношения мне ia требцов, и ювпов, ÔCI \ НОН и I 1

Иммуносгабилизирующее депс жис апи мка и ждистена в условиях физической наф\экн изучали у высококва инициированных спортсмснов- м\/кчин. uienna in «ирмотихся ” мш ппп ки\ тмах июрм с преимущественным проявлением выносливосли (академическая гребля, 1ыжные юнкп, îeiKoai кмический oci на с ре пню и пннные щетанпии, 10-2⁽) ici. чровень спортивной ква шфикапии oi к\к ю мемк) Bcei о в >кс перимен rax учаспзонато спорк’меном Ike они находи iiici. на sчебно-тренировочном сборе по иоювиie ibHoi о м иIа тдичнот цик ia под! (ловки с преобладанием тренировочных и,и р\ зок высокой мощное m ()ценк\ СОСТОЯНИЯ IIMMMIII01I системы \ КЛ/К1010 Hi оГк юдованных 1НЦ проводили дважды влечение сезона, в начале по;п отопительного периода и в конце его, перед началом соревновательного периода. За 3 недели до повторного определения иммунного статуса спортсмены получали курс исследуемых препаратов (или плацебо в контрольной группе). В пределах каждого эксперимента в каждой экспериментальной группе соблюдалось постоянство состава участников по их спортивной■специализации и уровню квалификации.

Все участвующие в экспериментах спортсмены на протяжении всего периода исследования находились под ежедневным врачебным контролем (осуществляемым врачом команды и врачом соответствующего врачебно-физкулыурного диспансера). При этом регистрировались как субъективное самочувствие участников эксперимента (состояние их сна, аппетита, желание их тренироваться, наличие жалоб), так и объективные показатели врачебного контроля (пульс, артериальное давление, параметры ‘ЖГ).

Оценка профилактического действия изученных препаратов на заболеваемость спортсменов на протяжении годичного учебно- тренировочного цикла проводилась у 308 спортсменов высокой квалификации (от кмс до мсмк), специализирующихся в циклических видах спорта с преимущественным проявлением выносливости (лыжные гонки, конькобежный спорт, плавание, легкоатлетический бег на средние и длинные дистанции, академическая гребля). Из них 170 человек составляли опытные группы и 138 человек – контрольную. Спортсмены из опытных групп дважды в год в осенне-зимний период получали курс изучаемых препаратов.

Все участники экспериментов своевременно, согласно установленным правилам проходили углубленное медицинское обследование в соответствующих врачебно-физкультурных диспансерах, были практически здоровы и во время проведения данных наблюдений ограничений тренировочным занятиям не имели. У спортсменов опытных и контрольной групп проводился учет, по данным медицинского анамнеза, общего количества заболеваний, их продолжительности и числа дней тренировки, количества острых респираторных инфекций (отдельно учитывались острые фарингиты и тонзиллиты), количества пропущенных по болезни тренировочных дней в течение каждого года наблюдения. Дополнительно, в течение 3-х лет проводились наблюдения и выписка данных о заболеваемости спортсменов из амбулаторных карт. В соответствии с принципами гигиенического нормирования расчет общего количества заболеваний велся на 100 человеко-дней наблюдения. На основании данных о помесячной заболеваемости острыми фарингитами и тонзиллитами на 100 обследованных спортсменов 3-летний период вычисляли верхний предел круглогодичной месячной заболеваемости спортсменов. С учетом медианных месячных показателей за многолетний

период наблюдения проводилось вычисление уровней круглогодичной и сезонной заболеваемости спортсменов острыми фарингитами и тонзиллитами по контрольной и опытной группам.

2.5.
Метод оценки анаболизирующей активности
фармакологических препаратов
(модель изолированной перегрузки
скелетной мышцы голени крыс)

Биологическая модель изолированной перегрузки скелетной мышцы голени крыс с операцией тенотомии [2] позволяет адекватно судить по степени гипертрофии m. soleus об анаболизирующей активности исследуемых препаратов. Сущность метода заключается в следующем. Под эфирным наркозом на задней поверхности правой голени крысы выстригается шерсть, проводится обработка тампоном со спиртом и производится разрез длиной 1,5-2 см. Затем иссекается двуглавая m. gastrocnemius (оба ее пучка латеральный и медиальный). Разрез зашивается. Оставшаяся нетронутой m. soleus прикреплена, как и у даленные пучки, к ахиллову сухожилию, и после операции принимает на себя основную тяжесть работы по поддержанию веса тела. Синергистом этой мышцы является m. plantaris, имеющая собственное сухожилие. Оценивалась гипертрофия m. soleus на оперированной конечности по сравнению с той же мышцей левой i олени.

2.6.
Антропометрический метод
определения состава тела

Антропометрические измерения проводились по В.В. Бунаку, калиперометрия – измерение кожно-жировых складок – осуществлялась по схеме Н.Ю. Лутовиновой [9,2,40].

Программа измерений включала:

• Длину тела (см)
• Массу тела (кг)
• Обхват грудной клетки (см)

1. Продольные и поперечные размеры тела, конечностей и ихсегментов (см)
   .Обхватные размеры сегментов конечностей:
   обхват плеча измерялся в месте наибольшего развития мышц плеча; рука свободно висит, мышцы расслаблены;
2. обхват предплечья измерялся в месте наибольшего развития мышц; рука свободно висит, мышцы расслаблены;
3. обхват бедра измерялся под ягодичной складкой, параллельно полу; исходное положение нот и на ширине плеч, равный упор на обе ноги;
4. обхват голени измерялся в месте максимального развития икроножной мышцы; исходное положение – ноги на ширине плеч, равный упор на обе ноги;
5. Кожно-жировые складки на теле:

• под нижним углом лопатки- измерялась под правой лопаткой в косом направлении сверху вниз;
• на задней поверхности плеча – измерялась на опущенной руке в верхней трети плеча (область трицепса) ближе к ее внутреннему краю, вертикально;
• на передней поверхности плеча измерялась на опущенной руке в верхней трети внутренней поверхности плеча (область трицепса) вертикально;
• на передней поверхности предплечья измерялась в верхней трети внутренней поверхности предплечья при согнутом положении руки, продольно;

на гр\ди измерялась пол правой !р\дной мышцей в направлении подмышечная впадина сс сок;

• на животе – измерялась на \ровне п\пка, справа от нею на 5 см, вертикально;
• на бедре – измерялась в положении сидя на а\ле, но[ и согнуты в коленях под прямым углом. Складка измеряется на передне- боковой поверхности бедра, так что захват локализуется в паховой складке:

– на голени – измерялась в том же положении, что и на бедре, вертикально на задне-боковой поверхности верхней части голени, на уровне нижнего угла подколенной ямки. Все измерения проводились с правой стороны.

Длина тела измерялась антропометром Мартина (точность 0,2 – 0,3 см). Масса тела – на медицинских весах (точность 0,05 кг), обхваты – сантиметровой лентой ( ючность 0,1 см).

Кожно-жировые складки измерялись калипером с постоянным давлением 10 г/кв.мм с площадью контактных плоскостей 30 кв.мм. Кожно-жировая складка захватывалась дв\мя пальцами (на конечности 2­3 см, на туловище 4-5 см) и перпендикулярно направлению складки прикладывались ножки калипера, фиксируя толщину складки с точностью 1 мм.

Г1о форм\ле ^акяоп [72] рассчитывали абсолютную поверхность тола S, \Г:

Я=1+0,01(1.-160^’), где I, – длина юла, \\’ масса тела.

Состав тела (мышечная и жировая масса) рассчитывался по форм\ле Mateigka [79]

Жировая масса: НВМ, кг = 0,08125 1(8 жировых складок, см) 5

Жировая масса, %: РВМ,%= 100 РВМ,кг^,кг

Мышечная масса: ММ, кг = [1(обхватов сегментов

конечностей)/25,12 – 0,01-Цжировых складок на сегментах

конечностей)]²-6,5Ь

ММ,%= 100-ММ,кт/\¥,кг

2.7.
Метод оценки специальной
физической работоспособности спортсменов

Специальная физическая работоспособность оценивалась на механическом гребном эргометре «ОеББ^» в тесте, имитирующем

соревновательную деяю 1ьность фебцов (2^е)]. Академическая гребля была выбрана в качестве модели вида спорта, где одинаково важны аэробные механизмы обеспечения физической работоспособности и силовые качества спортсмена. В академической гребле во время соревнований на протяжении 5,5-7,5 мин\т спортсмен совершае! от 200 до 270 гребков со средним усилием около 40-60 кг, при максимальном значении до 100 кг, с частотой порядка 32-40 фебков в мин\г\. Потребление кислорода достигает 7 л/мин (до 80 мл-мин-кг), что в 2 раза превышает уровень МПК для среднего человека. Диаметр мышечною волокна \ гребцов юго же порядка, что и в таком скоростно-силовом виде спорта, как тяжелая атлетика.

При тестировании нл гребном >ргометре спортсменами за 6 мин. (средняя продолжительность гонки в академической фебле) выполнялась максимально возможная работа при стандартном сопротивлении 30 кг, регистрировалось количество оборотов тормозного барабана, которое пересчитывалось в количество произведенной механической работы (стандартная ошибка составляла 300 кгм). Кислотно-щелочное равновесие испытуемых оценивали по величине рН крови и содержанию буферных оснований BE в крови, определяемых с помощью анализатора газов крови фирмы «Eschweiler Со» (ФРГ). Лактат в крови Определяли с помощью лактат-анализатора фирмы «Yellow Springs Instrument Со» (США). 2.8. Оценка функциональных резервов коры надпочечников

В настоящее время в экспериментальной и клинической эндокринологии функциональные резервы коры надпочечников оценивают по содержанию кортизола в крови до и после стимуляции надпочечников АКТ! , а также путем определения экскреции глюкокортикоидов, их конъюгатов и метаболитов в моче [31,2,1 1]. Более точным и удобным (поскольку не связано со сбором суточной мочи) является непосредственное определение кортизола в крови.

В покое нормальное содержание кортизола в плазме крови спортсменов составляет Ь-15 мкг%, при сильном стрессе 35-55 мкг%. В случае внутримышечного введения 40 НД кортикотропина свидетельством нормальных резервов коры надпочечников является определяемый через 2 часа после инъекции прирост содержания кортизола не менее чем в 2-3 раза по сравнению с исходным уровнем, составляющим утром, в среднем, 17 мкг% [31,11].

У спортсменов различной квалификации дважды в течение годичного цикла подготовки, в начале и в конце подготовительного периода, проводили оценку величины функциональных резервов коры надпочечников. Для этого определяли содержание кортизола в пробе крови (из пальца) утром натощак, а также через 2 часа после внутримышечного введения 40 ЕД Svnacten. Величина функциональных резервов коры надпочечников характеризовалась приростом содержания кортизола по сравнению с базальным уровнем на фоне стимуляции АКТГ.

Содержание гормона в сыворотке крови определяли радиоиммунным методом с использованием стандартного набора фирмы «Clinical Assay» (CILIA). Принцип исследования основан на конкуренции между меченным 1 кортиюлом и кортизолом. содержащимся в craiuapiax и образцах, при фиксированном и ограниченном числе мест связывания на антителах. После инкубации количество меченного кортизола, связанного с антителами, обратно пропорционально количеству немеченного кортизола в пробе.

Исследование каждого образца и всех стандартов поводили дважды, методом двух параллелей. Радиоактивность образцов измеряли с помощью счетчика фирмы «Searle», эффективность счета составляла 80%.

Построение калибровочной кривой и обработка результатов производилась с помощью программы, задающейся автоматически. 2.9. Изучение состояния иммунной системы спортсменов

Изучение состояния иммунной системы спортсменов проводилось по показателям клеточного, гуморального и секреторного иммунитета. Изучалось процентное и абсолютное содержание в венозной крови Т- лимфоцитов, процентное и абсолютное содержание в крови В- лимфоцитов, содержание в сыворотке крови иммуноглобулинов классов А, в, М и нормальных антител к дифтерийному, столбнячному, стафилококковому и коклюшному токсинам. Секреторный иммунитет оценивали по содержанию в слюне иммуноглобулинов А, в и суммарному содержанию иммуноглобулинов классов в и М (8-1§А).

Содержание в крови Т- и В-лимфоцигов определяли с помощью реакции розеткообразования с фиброцитами животных согласно методическим рекомендациям МЗ СССР, по методу Джондал [34]. Содержание в крови иммуноглобулинов классов А, О и М определяли микрометодом Кузьмина С.Н. и соавторами [34,33]. При этом проводились исследования сыворотки смешанной капиллярной крови, взятой из пальца, а также исследования слюны. Используемые объемы биопроб составляли по 6 мкл. Иммуноглоб\лины определялись методом радиальной иммунодиффузии по Манчини [78] с использованием моноспецифических сывороток против отдельных иммуноглобулинов человека (производства МНИИВС им. И.И.Мечникова).

В сыворотке крови (0,15 мл) с помощью реакции пассивной гемагглютинации определялись титры нормальных антител к токсинам возбудителей ряда инфекционных заболеваний (столбнячному, стафилококковому, дифтерийному, коклюша) [21]. 2.10. Методы статистической оценки результатов

Статистическая обработка полученных результатов проводилась по методу Стъюдента.

 

Сравнительное изучение анаболизируещего и иммуностабилизируещего действия препаратов апилак и экдистен при физической нагрузке. Оглавление.

Сравнительное изучение анаболизируещего и иммуностабилизируещего действия препаратов апилак и экдистен при физической нагрузке. Введение.

Сравнительное изучение анаболизируещего и иммуностабилизируещего действия препаратов апилак и экдистен при физической нагрузке. Глава I.

Сравнительное изучение анаболизируещего и иммуностабилизируещего действия препаратов апилак и экдистен при физической нагрузке. Глава II.

Сравнительное изучение анаболизируещего и иммуностабилизируещего действия препаратов апилак и экдистен при физической нагрузке. Глава III.

Сравнительное изучение анаболизируещего и иммуностабилизируещего действия препаратов апилак и экдистен при физической нагрузке. Глава IV.