О.А. Федина «Влияние экстрактов левзеи сафлоровидной и лихниса хальцедонского на показатели системы гемостаза в условиях различных моделей гиперкоагуляционного синдрома у крыс». Глава III

ГОСУДАРСТВЕННОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ
ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬ­НОГО ОБРАЗОВАНИЯ
СИБИРСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИН­СКИЙ УНИВЕРСИТЕТ

Автор:

ФЕДИНА ОЛЕСЯ АЛЕКСАНДРОВНА

Диссертация
«ВЛИЯНИЕ ЭКСТРАКТОВ ЛЕВЗЕИ САФЛОРОВИДНОЙ
И ЛИХНИСА ХАЛЬЦЕДОНСКОГО НА ПОКАЗАТЕЛИ СИСТЕМЫ
ГЕМОСТАЗА В УС­ЛОВИЯХ РАЗЛИЧНЫХ МОДЕЛЕЙ
ГИПЕРКОАГУЛЯЦИОННОГО СИН­ДРОМА У КРЫС»

 

 ГЛАВА III. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

 

3.1.Влияние экстрактов левзеи и лихниса
на свертывающую систему крови в условиях моделей
сердечно-сосудистой патологии у крыс

3.1.1. Влияние экстрактов левзеи и лихниса на агрегацию тромбоцитов и свертывающую активность крови на модели инфаркта миокарда

Нарушения микроциркуляции вследствие образования тромбоцитарных агрегатов и тромбов в местах стенозов коронарных артерий являются важ­ными факторами патогенеза ишемической болезни сердца и инфаркта мио­карда [119, 124, 184]. Установлено, что агрегатное состояние крови коррели­рует с выраженностью нарушений коронарного кровотока. Это обусловлено как окклюзией коронарных артерий томбоцитарными агрегатами [49, 138], так и высвобождением из активированных кровяных пластинок биологиче­ски активных веществ: тромбоксана, АДФ, серотонина, (3-тромбоглобулина, вызывающих вазоконстрикцию и дальнейшую агрегацию тромбоцитов [124, 227].

В наших исследованиях на 5-е сутки после создания модели инфаркта миокарда у крыс Вистар наблюдалось достоверное повышение АДФ- индуцированной агрегации тромбоцитов. Так, в сравнении со значениями у интактных животных, к 5-м суткам после воспроизведения инфаркта миокар­да амплитуда агрегации тромбоцитов увеличивалась на 52% (табл. 1, рис. 1). Повышение функциональной активности тромбоцитов в ранние сроки ин­фаркта миокарда отмечено в экспериментах на животных и у больных боль­шинством исследователей [8, 52, 118, 219]. Полагают, что гиперагрегация тромбоцитов в этот период обусловлена повышением активности симпатоадреналовой системы, увеличением содержания в крови АДФ, тканевого тромбопластина [89, 124, 165], снижением чувствительности кровяных пластинок к простациклину [96, 229]. В более поздние сроки развития инфаркта мио­карда гиперактивность тромбоцитов поддерживается циркулирующими в крови продуктами деструкции миокарда, нарушением ассиметрии липидов в мембранах тромбоцитов [23, 138].

Повышение агрегации тромбоцитов приводит к выбросу значительных количеств тромбоксана, серотонина, АДФ, Р-тромбоглобулина, создавая ус­ловия для вторичного спазма коронарных сосудов и расширения зон инфарк­та [96].

При инфаркте миокарда и у больных ишемической болезнью сердца на­блюдаются также нарушения плазменного гемостаза различной степени вы­раженности, отмечено повышение активности плазменных факторов сверты­вания крови, нарушение процессов фибринолиза [136, 183, 196].

Наиболее выраженные изменения со значительной активацией прокоагулянтных факторов, снижением на 20-40% активности физиологических ан­тикоагулянтов отмечаются у больных с нестабильной стенокардией и в пост­инфарктном периоде [115].

В наших исследованиях на 5-е сутки после перевязки коронарной арте­рии также зарегистрировано изменение показателей, характеризующих плаз­менный гемостаз. Так, время начала, продолжительности и конца свертыва­ния снижалось на 29%, 20% и 23% соответственно. Протромбиновое время достоверно уменьшалось на 11 %. Статистически значимых изменений АЧТВ не отмечено (табл. 2, рис. 2). Полученные данные свидетельствуют о повы­шение активности плазменного гемостаза в условиях воспроизведенного ин­фаркта миокарда у крыс.

Повышение активности плазменных факторов свертывания вместе с ги­перагрегацией тромбоцитов, в условиях использования нами модели инфарк­та миокарда, свидетельствуют об однонаправленности наблюдаемых измене­ний с динамикой коагуляционного потенциала крови больных инфарктом миокарда [189, 226].

Раннее было отмечено, что в условиях этой же модели развивалась вы­раженная гиперфибринемия: содержание фибриногена в плазме через сутки в 2,4 раза превышало нормальный уровень и оставалось повышенным в 1,5 – 1,6 раза спустя 5 и 7 суток после перевязки коронарной артерии [5].

Рост уровня фибриногена наблюдался также и у больных с острым и хроническим коронарогенным поражением миокарда [49, 124]. В свою оче­редь повышение фибриногена в плазме крови у крыс с моделью инфаркта миокарда коррелирует с ростом вязкости крови [26], что является одной из главных причин нарушения реологических свойств крови, играющих важную роль в прогрессировании заболевания [178, 188].

Таким образом, воспроизведенная модель инфаркта миокарда у крыс со­провождается изменениями тромбоцитарно-сосудистого и плазменного звеньев гемостаза, которые проявляются повышением агрегационных и коагуляционных свойств крови.

Курсовое применение экстракта лихниса при инфаркте миокарда вызы­вало уменьшение агрегации тромбоцитов на 13%, а введение экстракта левзеи – на 19% по сравнению с контрольной группой (табл. 1, рис. 1).

 

Таблица 1

Влияние курсового (5 дней) введения экстрактов лихниса и левзеи (150 мг/кг внутрижелудочно)
на АДФ-индуцированную агрегацию тромбоцитов (А, %) крыс с инфарктом миокарда (Х±ш)

Интактные животные п=6	Контроль п=6	Экстракт лихниса п=6	Экстракт левзеи п=6
31±5,0	47±1,4*	41±2,0*#	38±3,7#

Примечание: * – р<0,05 по сравнению со значениями у интактных животных;

# – р<0,05 по сравнению с контролем@ интактные □ контроль ш экстракт лихниса га экстракт левзеи

Рис. 1. Влияние курсового введения экстрактов лихниса и левзеи на ампли­туду агрегации тромбоцитов (А) у крыс с инфарктом миокарда. Значения показателей у интактных крыс Вистар приняты за 100%. * – р<0,05 по сравнению со значениями у интактных животных; # – р<0,05 по сравнению с контролем

Характеризуя выявленное нами антиагрегантное действие экстрактов левзеи и лихниса, следует учитывать наличие в механизме этого эффекта та­кого косвенного фактора, как способность фитоэкдистероидов, входящих в их состав, оказывать в условиях патологии нормализующее действие на фракционный состав мембран. Это действие экдистероидов проявляется в различных органах, в частности, в мембранах митохондрий печени при экс­периментальной инсулиновой недостаточности [Сыров], в мембранах эрит­роцитов на моделях инфаркта миокарда и ишемии мозга [Алиев]. Нормали­зация исследуемыми экстрактами фосфолипидного состава мембран тромбо­цитов существенно снижают их повышенный при инфаркте миокарда агрегационный потенциал.

Помимо экдистероидов в состав изучаемых экстрактов входят и такие биологически активные вещества как биофлавоноиды [27]. Как известно,

флавоноиды повышают уровень цАМФ и цГМФ в тромбоцитах за счет инги- бирования фосфодиэстераз, осуществляющих метаболический распад цикли­ческих нуклеотидов [158, 203]. Экстракты левзеи и лихниса за счет флавоно- идной фракции могут уменьшать активность фосфодиэстераз, приводя к по­вышению концентрации циклических нуклеотидов в тромбоцитах и умень­шению их агрегационной активности.

Кроме того, есть данные о том, что экстракты левзеи и лихниса в усло­виях модели инфаркта миокарда способны повышать важнейший показатель клеточной реологии — деформируемость эритроцитов [27]. Сохранение де­формационной способности эритроцитов предупреждает разрушение клеток крови повреждающими факторами, в результате – уменьшается выход проагрегантов.

Следовательно, наблюдаемое уменьшение агрегационных свойств тром­боцитов при введении экстрактов левзеи и лихниса в условиях модели ин­фаркта миокарда может быть обусловлено их способностью восстанавливать естественную атромбогенность клеток крови за счет нормализации фосфолипидного состава мембран и повышения уровня циклических нуклеотидов в кровяных пластинках.

В опытной группе животных с инфарктом миокарда при введении экс­тракта лихниса время начала, продолжительности и конца свертывания крови увеличивались, по сравнению с контролем, на 59%, 61% и 58% соответствен­но. Протромбиновое время у крыс этой группы достоверно повышалось на 9%, а АЧТВ – на 9% по сравнению с животными не получавшими лечения. Применение экстракта левзеи также снижало коагуляционные свойства кро­ви, вызывая изменение показателей, характеризующих плазменное звено ге­мостаза: время начала свертывания увеличивалось на 68%, продолжительно­сти – на 71%, конца свертывания – на 67% по сравнению с контролем. Кроме того, протромбиновое время повышалось на 7% по сравнению с контроль­ными значениями (табл. 2, рис. 2).

 

Таблица 2

Влияние курсового (5 дней) введения экстрактов лихниса и левзеи (150 мг/кг внутрижелудочно)
на протромбиновое время (ПТ, сек),активированное частичное тромбопластиновое время (АЧТВ, сек),
время начала, продолжительности и конца свертывания (Т_ь Т₂, Т₃, сек) при инфаркте миокарда у крыс (Х±ш)

Условия опыта	ПТ	АЧТВ	Т,	т2	Т3
Интактные животные п=6	15,6±0,4	13,3±0,8	31±2	82±6	110±6
Контроль п=6	13,9±0,1[1]	13,0±0,3	22±1*	66±2*	85±3*
Экстракт лихниса п=6	15,2±0,2#	14,1±0,2#	35±3#	106±10#	134±12#
Экстракт левзеи п=6	14,9±0,1#	13,2±0,3	37±3#	113±13#	142±15#

Примечание: * – р<0,05 по сравнению со значениями у интактных животных; # – р<0,05 по сравнению с контролемние АДФ-индуцированной агрегации тромбоцитов, замедление фаз сверты­вания крови, увеличение протромбинового времени и активированного час­тичного тромбопластинового времени.

Анализируя механизмы влияния экстрактов левзеи и лихниса на коагуляционные свойства крови, следует отметить, что тромбоциты являются цен­тральным звеном гемостаза. Для взаимодействия факторов коагуляции в циркулирующей крови необходимы фосфолипиды поврежденных тромбоци­тов, на поверхности которых создаются оптимальные стерические отноше­нии для факторов свертывания крови [13, 81]. Очевидно, что экстракты лев­зеи и лихниса, снижая функциональную активность тромбоцитов, угнетают реакции активации факторов свертывания крови, что приводит к уменьше­нию гиперкоагуляционного синдрома в условиях модели инфаркта миокарда.

Таким образом, курсовое применение экстрактов лихниса и левзеи у крыс с воспроизведенным инфарктом миокарда сопровождается антиагрегантным и гипокоагуляционным эффектами, о чем свидетельствуют снижение АДФ-индуцированной агрегации тромбоцитов, замедление фаз сверты­вания крови, увеличение протромбинового времени и активированного час­тичного тромбопластинового времени.

 

3.1.2. Влияние экстрактов левзеи и лихниса на агрегацию тромбоцитов и свертывающую активность крови на модели ишемии мозга

Одним из основных патогенетических механизмов, определяющих воз­никновение и прогрессирование ишемических церебральных расстройств, являются нарушения в системе гемокоагуляции. Пусковым звеном в этом процессе являются тромбоциты, полифункциональные клетки, ранее других компонентов гемостаза реагирующие на инициирующие воздействия [37, 154, 179,218].

При инсульте повышенный уровень агрегации тромбоцитов и гиперкоа­гуляция в сочетании с наличием в крови растворимых фибрин-мономерных комплексов ассоциируются со стойким неврологическим дефицитом и высо­кой частотой летальных исходов [60, 123].

В результате проведенных нами экспериментов установлено, что на 5-е сутки после моделирования ишемии мозга у крыс Вистар наблюдалось зна­чительное возрастание агрегационной способности кровяных пластинок. Аг­регация тромбоцитов, индуцированная АДФ, увеличивалась в 2 раза по срав­нению с интактными животными (табл. 3, рис. 3).

 

Таблица 3

Влияние курсового (5 дней) введения экстрактов лихниса и левзеи (150 мг/кг внутрижелудочно)
на АДФ-индуцированную агрегацию тромбоцитов (А, %) крыс с ишемией мозга (Х±т)

Интактные животные п=6	Контроль п=6	Экстракт лихниса п=6	Экстракт левзеи п=6
31±5,0	63±2,6*	47±3,7*#	36±6,9#

Примечание: * -р<0,05 по сравнению со значениями у интактных животных;

# – р<0,05 по сравнению с контролем

В интактные □ контроль ей экстракт лихниса @ экстракт левзеи

Рис 3. Влияние курсового введения экстрактов лихниса и левзеи на амплиту­ду агрегации тромбоцитов (А) при ишемии мозга у крыс. Значения показателей у интактных крыс Вистар приняты за 100%. * – р<0,05 по сравнению со значениями у интактных животных; # – р<0,05 по сравнению с контролем

Однонаправленность изменений агрегационной активности тромбоцитов в сторону ее увеличения выявлены во многих исследованиях как у животных с экспериментальной ишемией мозга, так и больных с инсультом [29, 60, 132, 179].

Известно, что при нарушениях мозгового кровообращения, формирую­щихся на фоне атеросклероза магистральных сосудов, общим механизмом гиперагрегации тромбоцитов и атеротромбогенеза является нарушение гео­метрии потока крови в области атеросклеротическоЙ бляшки, которая спо­собствует возникновению очагов турбулентности с зонами высоких скоро­стей сдвига, где происходит активация тромбоцитов с последующей их агре­гацией [59, 132, 214]. В наших экспериментах ишемия мозга у крыс достига­лась полной перевязкой левой сонной артерии и стенозом правой сонной ар­терии, который вызывал нарушение геометрии потока крови и образование очагов турбулентности.

Формирование очагов турбулентности с зонами высоких скоростей сдвига в условиях нашей модели, вероятно, способствует активации и гипе­рагрегации тромбоцитов [59, 172]. Эти нарушения тромбоцитарнососудистого звена гемокоагуляции характеризуют нарастание тромбогенного потенциала крови при инсульте и инициируют коагуляционное звено гемо­стаза [13, 71, 123].

Кроме того, в острой фазе инсульта проагрегантное действие оказывает массивное поступление катехоламинов из ишемизированной ткани мозга [59]. На фоне истощения атромбогенных эндотелиальных резервов [4, 181] снижается способность кровяных пластинок к дезагрегации, повышается прочность образующихся в кровотоке тромбоцитарных агрегатов [132].

Нарушения гемокоагуляции, антикоагуляционной и фибринолитической активности свертывающей системы крови при цереброваскулярной патоло­гии весьма распространены [39, 132, 147].

В наших исследованиях на 5-сутки после перевязки сонных артерий у крыс отмечено повышение гемокоагуляции, которое выражалось достовер­ным уменьшением, по сравнению с интактными животными, протромбинового времени на 10%, продолжительности свертывания на 15%. Вместе с тем, значения других параметров коагулограммы (Т] и Тз) и АЧТВ не достигали уровня достоверных различий (табл. 4, рис. 4). Повышение ряда показателей, характеризующих плазменную активность свертывающей системы крови, возможно, обусловлено стрессорной реакцией системы гемостаза на ткане­вую гипоксию [60]. Дополнительным фактором повышения коагуляционного потенциала крови может быть рост уровня фибриногена, который был зафик­сирован в исследованиях на аналогичной модели ишемии мозга у крыс [101]. Такие же изменения отмечены у больных с нарушениями мозгового кровооб­ращения [59].

 

Таблица 4

Влияние курсового (5 дней) введения экстрактов лихниса и левзеи (150 мг/кг внутрижелудочно) на
протромбиновое время (ПТ, сек),активированное частичное тромбопластиновое время (АЧТВ, сек),
время начала, продолжительности и конца свертывания (Tj Т₂ Т₃, сек) при ишемии мозга у крыс (Х±т)

Условия опыта	ПТ	АЧТВ	т,	Т2	Т3
Интактные животные п=6	15,6±0,4	13,3±0,8	31±2	82±6	110±6
Контроль п=6	14,0±0,3[2]	14,3±0,2	35±9	70±3*	104±5
Экстракт лихниса п=6	15,5±0,2#	14,0±1,0	55±6#*	120±19#*	175±20#*
Экстракт левзеи п=6	15,7±0,3#	14,5±1,0	61±4#*	128±14#*	189±14#*

Примечание: * – р<0,05 по сравнению со значениями у интактных животных; # – р<0,05 по сравнению с контролем

В отдельной серии экспериментов в условиях in vitro с помощью турбидиметрического метода был оценен процесс образования фибринового сгуст­ка в плазме крови, взятой у крыс с ишемией мозга. Время образования рас­творимого фибринполимера достоверно снижалось на 15%, более чем в 2 раза возрастала максимальная скорость свертывания крови по сравнению с интактными крысами (табл. 5, рис. 5).

Таким образом, в условиях модели ишемии мозга у крыс выявлена гипе­рагрегация тромбоцитов наряду с активацией коагуляционного звена гемо­стаза.

Отмеченные нами изменения гемостаза у животных с ишемией мозга аналогичны таковым у больных с инсультом [59, 123, 132, 147], что подтвер­ждает адекватность модели и возможность использования ее для доклинических исследований средств, влияющих на гемостаз.

Курсовое введение экстракта лихниса крысам с ишемией мозга вызыва­ло достоверное снижение агрегации тромбоцитов на 25% (табл. 3, рис. 3), увеличение времени начала, продолжительности и конца свертывания крови на 57%, 71% и 68% соответственно, повышение протромбинового времени на 11% по сравнению с контрольной группой животных (табл. 4, рис. 4).

Кроме того, в опытах in vitro преинкубация плазмы крови с экстрактом лихниса вызывали уменьшение максимальной скорости свертывания крови в 2 раза и тенденцию к возрастанию времени образования фибринового сгустка (табл. 5, рис. 5).

 

Таблица 5

Влияние экстрактов лихниса и левзеи (в конечной концентрации 1хЮ”⁵ г/мл плазмы) на
время образования растворимого фибрин-полимера (Ti_ag, сек),
максимальную скорость свертывания (V_CD, tg а) крови крыс с ишемией мозга (Х±т)

Условия опыта	Tlag	VCB
Интактные животные п=6	20,0±1,2	0,510±0,19
Контроль п=6	17,0±0,9*	1,205±0,28*
Экстракт лихниса п=6	19,0±1,4	0,624±0,21#
Экстракт левзеи п=6	18,0±1,2	0,627±0,15*

Примечание: * -р<0,05 по сравнению со значениями у интактных животных

# – р<0,05 по сравнению с контролем

Рис 5. Кривые образования фибринового сгустка в плазме крыс с ишемией мозга под действием тромбина (2 мг/мл).

Т^ – время образования фибринового сгустка (сек); tg а – максимальная скорость свертывания

Курсовое введение экстракта левзеи также вызывало статистически зна­чимое снижение агрегации тромбоцитов на 43% (табл. 3, рис. 3), уменьшение коагуляционного потенциала крови, что проявлялось увеличением времени свертывания крови: начала – на 74%, продолжительности – на 83% и конца свертывания – на 82%, протромбиновое время достоверно увеличивалось на 12% в сравнении с животными контрольной группы (табл. 4, рис. 4). В опы­тах in vitro максимальная скорость свертывания, инициированная тромбином, после преинкубации с экстрактом левзеи снижалась почти в 2 раза, по срав­нению с крысами не получавшими лечения. Время образования растворимого фибрин-полимера имело тенденцию к возрастанию и, в отличие от контроль­ных животных, достоверно не отличались от такового у интактных крыс (табл. 5, рис. 5).

Анализируя механизмы антитромбоцитарного действия исследуемых экстрактов, следует отметить их выраженную гемореологическую активность в условиях модели ишемии мозга [5, 27, 103]. Нарушение функциональной активности эритроцитов и тромбоцитов имеют „динамическую составляю­щую”, обусловленную нарушением клеточного взаимоотношения в потоке крови. Повышенная агрегируемость эритроцитов приводит к вытеснению тромбоцитов из осевой части потока на периферию, в пристеночную область, в зону высоких скоростей сдвига, где происходит их разрушение и активация тромбоцитарного звена свертывающей системы крови [Reinhart W.H. 1995]. Наблюдаемое в раннее проведенных экспериментах при ишемии мозга у крыс при курсовом введении экстрактов левзеи и лихниса ослабление агрега­ции эритроцитов, повышение их деформируемости, приводит к нормализа­ции стабильности клеток крови, что препятствует выходу биологически ак­тивных веществ проагрегантного и прокоагулянтного действия.

Модулируемая в наших экспериментах ишемия мозга протекает на фоне ярко выраженного окислительного стресса [19]. Ранее установлено наличие у экстрактов антиокислительных и антирадикальных свойств, связанное как с присутствием в их составе полифенольных соединений, так и фитоэкдисте- роидов [102]. Флавоноиды снижают образование и/или освобождение сво­бодных радикалов макрофагами, предотвращают окисление липопротеинов низкой плотности [107, 149, 192]. Фитоэкдистероиды, нормализуя фосфоли- пидный состав мембран, проявляют свойства структурных антиоксидантов [129]. Снижая интенсивность ПОЛ в мембранах клеток крови, исследуемые экстракты оказывают положительное влияние на состояние тромбоцитарного гемостаза и, как следствие, коагуляционного гемостаза.

Поскольку экстракты лихниса и левзеи при их инкубации с плазмой крови, полученной у крыс с ишемией мозга, замедляли скорость свертывания и способствовали повышению времени образования фибринового сгустка при добавлении в пробу тромбина, есть все основания считать, что одним из механизмов антикоагулянтного действия исследуемых экстрактов является их способность ингибировать тромбин. Этот эффект экстрактов лихниса и левзеи не является прямым, поскольку было установлено, что преинкубация тромбина с исследуемыми экстрактами не приводила к снижению его коагу- ляционной активности.

Следовательно, экстракты лихниса хальцедонского и левзеи сафлоро- видной обладают способностью уменьшать тромбогенный потенциал крови у крыс с ишемией мозга за счет снижения агрегационной активности тромбо­цитов и уменьшения коагуляционных свойств крови.

 

3.1.3. Влияние экстрактов левзеи и лихниса на агрегацию тромбоцитов и свертывающую активность крови у спонтанно гипертензивных крыс

Повышенный тромбогенный потенциал крови является фактором риска тромбоэмболических осложнений при артериальной гипертензии [10, 95, 104]. Особенно часто эти осложнения возникают при гипертонических кри­зах, сопровождающихся резким перепадом давления, вызывающим наруше­ния со стороны тромбоцитов и эндотелия сосудистой стенки, что приводит к расстройству гемостаза и создает предпосылки для развития тромбозов [121, 181, 202]. При артериальной гипертензии установлена корреляционная связь между интенсивностью агрегации кровяных пластинок и системным артери­альным давлением [82, 151]. Рост агрегации кровяных пластинок при артери­альной гипертензии зафиксирован как у больных, так и в экспериментах на животных [82, 104, 121, 151, 160].

В наших исследованиях агрегация тромбоцитов у спонтанно гипертен­зивных крыс достоверно отличалась от соответствующих показателей у крыс Вистар, представляющих нормотензивный контроль. Наблюдалось увеличе­ние амплитуды агрегации тромбоцитов на 29% в сравнении с аналогичным показателем крыс Вистар (табл. 6, рис. 6). Повышенная агрегационная актив­ность тромбоцитов гипертензивных крыс обусловлена более сильной, чем у нормотензивных животных способностью АДФ ингибировать аденилатцик- лазу и, как следствие, вызывать большее снижение уровня цАМФ в тромбо­цитах. Понижение уровня цАМФ в тромбоцитах является одним из ранних критериев нарушения функционального состояния тромбоцитов [106]. Кон- трактильные процессы, связанные с агрегацией и секрецией тромбоцитов,

стимулирует Са” [139], внутриклеточная концентрация которого увеличива­Л |

ется при артериальной гипертензии [95]. Под действием Са повышается ак­тивность фосфолипазы А₂, высвобождающей арахидоновую кислоту, про­дуктом метаболизма которой является мощный проагрегант – ТхА₂ [10, 230]. Кроме того, снижается чувствительность тромбоцитов к простациклину, что при артериальной гипертензии приводит к устранению ограничения агрега­ции тромбоцитов в сосудистом русле [46].

В регуляции функционального состояния системы гемостаза при пато­логии сердечно-сосудистой системы и артериальной гипертензии в частности активное участие принимает эндотелий сосудистой стенки [46, 150]. Гипе­рагрегация тромбоцитов при артериальной гипертензии может быть следст­вием непосредственного влияния повышенного артериального давления на кровяные пластинки, но большинство авторов связывают этот процесс со снижением простациклинобразующей функции эндотелия [122, 191]. Влия­ние простациклина на кровяные пластинки охватывает почти весь комплекс тромбоцитарных функций. Показано, что простациклин ингибирует первую стадию тромбоза – адгезию к компонентам субэндотелия и коллагену и, в ре­зультате этого, агрегацию тромбоцитов. Клеточные механизмы действия простациклина заключаются в его способности тормозить активность адени- латциклазы, уменьшать образование цАМФ в тромбоцитах, что приводит к снижению их агрегационной способности [46, 223].

Нами проведено исследование антиагрегантной активности сосудистой стенки у спонтанно гипертензивных крыс, суть которого заключалась к ин­кубации сосудистого сегмента брюшной аорты животных в богатой тромбо­цитами плазме с последующей регистрацией АДФ-индуцированной агрега­ции. Было установлено, что амплитуда агрегации тромбоцитов при их инку­бации с сегментом сосуда гипертензивных крыс уменьшалась на 18% по сравнению со значениями АДФ-индуцированной агрегации без преинкуба- ции с сосудом (табл.7). Важным механизмом, модифицирующим функцио­нальную активность тромбоцитов при артериальной гипертензии, является гемодинамический фактор, снижающий атромбогенный потенциал эндотелия сосудов, в результате чего повышается вероятность активизации кровяных пластинок при контакте с эндотелиоцитами [14, 51].

По мере прогрессирования артериальной гипертензии гиперкоагуляция крови нарастает не только в результате расстройства тромбоцитарно- сосудистого звена гемостаза, но и за счет снижения антикоагулянтной актив­ности и депрессии фибринолиза в результате повышения содержания в крови ингибиторов активации плазминогена и антиплазминов [93]

У спонтанно гипертензивных крыс нами также установлено повышение активности плазменного звена гемокоагуляции, характеризующееся умень­шением продолжительности свертывания крови в сравнении со значениями у крыс Вистар. Так, время начала, продолжительности и конца свертывания достоверно снижалось на 16%, 13% и на 11% соответственно. Протромбино- вое время и АЧТВ у крыс линии БНЯ достоверно не изменялись (табл. 8, рис.7).

Таким образом, изменения всего исследованного комплекса показателей системы гемостаза свидетельствует о наличии гиперкоагуляционного син­дрома у спонтанно гипертензивных крыс, проявляющегося достоверным снижением антиагрегантной активности сосудистой стенки, повышением аг­регации тромбоцитов и некоторых параметров плазменной коагуляции. От­меченные изменения аналогичны имеющимся расстройствам гемостаза у больных артериальной гипертензией, что позволяет использовать крыс линии БНЯ в качестве модели этого заболевания при доклиническом исследовании новых лекарственных средств, влияющих на свертывающую активность кро­ви.

Курсовое введение экстракта лихниса крысам линии БНЫ снижало сте­пень агрегации тромбоцитов на 38% по сравнению с животными не полу­чавшими лечения. Применение экстракта левзеи не вызывало достоверных изменений амплитуды агрегации тромбоцитов по сравнению с контрольной группой (табл. 6, рис. 6).

 

Таблица 6

Влияние курсового (14 дней) введения экстрактов лихниса и левзеи (150 мг/кг внутрижелудочно) на
АДФ-индуцированную агрегацию тромбоцитов (А, %) у спонтанно гипертензивных крыс (Х±ш)

Крысы Вистар п=6	Контроль (крысы линии SHR) п~6	Экстракт лихниса п=6	Экстракт левзеи п=6
31±5,0	40±3,9*	25±4,0″	39±2,3*

Примечание: * -р<0,05 по сравнению со значениями у крыс Вистар # – р<0,05 по сравнению с контролем

и интактные □ контроль па экстракт лихниса ш экстракт левзеи

Рис 6. Влияние курсового введения экстрактов лихниса и левзеи на амплиту­ду агрегации тромбоцитов (А) у спонтанно гипертензивных крыс. Значения показателей у интактных крыс Вистар приняты за 100%.

* – р<0,05 по сравнению со значениями у интактных животных; * – р<0,05 по сравнению с контролем

Учитывая важный вклад эндотелия сосудов в антитромбогенный потен­циал крови в целом и агрегацию тромбоцитов в частности [181], нами изучено влияние экстрактов левзеи и лихниса на антиагрегантную активность со­судистой стенки у крыс линии ЗЕК.. Преинкубация сосудистого сегмента брюшной аорты гииертензивных крыс опытных групп, получавших иссле­дуемые экстракты в течение 14 дней, ослабляла АДФ-индуцированную агре­гацию тромбоцитов в 2 раза по сравнению с реакцией кровяных пластинок крыс линии БНИ. без инкубации с сосудом (контроль I). У животных не полу­чавших лечения эндотелий сегмента сосуда также способствовал снижению амплитуды агрегации, но только на 18% (контроль II), по сравнению со зна­чениями у крыс, представляющих контроль I. Агрегация тромбоцитов с пре- инкубацией сосуда в группах животных получавших экстракты лихниса и левзеи была 20% и 19% соответственно, тогда как без лечения (контроль II) – 31% (табл. 7).

Таблица 7

Влияние курсового (14 дней) введения экстрактов лихниса и левзеи (150 мг/кг внутрижелудочно) на
АДФ-индуцированную агрегацию тромбоцитов (А, %) после их инкубации с сегментом сосуда спонтанно гипертензивных крыс (Х±т)

Без инкубации с сегментом сосуда	Инкубация с сегментом сосуда
Контроль I п=6	Контроль II п—6	Экстракт лихниса п=6	Экстракт левзеи п=6
38±3,1	31±1,9*	20±2,1**	19±3,3*#

Примечание: * -р<0,05 по сравнению с контролем 1

* – р<0,05 по сравнению с контролем II

 

Способность экстрактов левзеи и лихниса повышать антиагрегантную активность сосудистой стенки, уменьшать АДФ-индуцированную агрегацию тромбоцитов у спонтанно гипертензивных крыс, вероятно, связаны с наличи­ем антиокислительной активности экстрактов [27, 101]. ПОЛ способно изме­нять мембранные фосфолипиды кровяных пластинок [111], а также осущест­влять окислительную модификацию липопротеинов плазмы крови, которые приобретают при этом проагрегантные свойства [16, 24, 65], оказывают цитотоксическое и деструктивное влияние на клетки эндотелия кровеносных сосудов [53], синтезирующих простациклин. Подавление синтеза простациклина при повреждении эндотелия, усиливает развитие артериальной гипертензии [64]. Можно предположить, что исследуемые экстракты, снижая обра­зование свободных радикалов, предотвращая окислительное повреждение липопротеинов низкой плотности у спонтанно гипертензивных крыс, норма­лизуют состояние тромбоцитарного звена гемостаза, повышают антиагре­гантную активность сосудистой стенки.

Помимо влияния на тромбоцитарно-сосудистое звено гемостаза, экс­тракты левзеи и лихниса оказывали воздействие и на коагуляционную актив­ность крови у гипертензивных крыс. Так, в группе животных леченных экс­трактом лихниса время начала, продолжительности и конца свертывания достоверно увеличивались на 69%, 59% и 67% соответственно по сравнению с контролем. Наблюдалось также повышение протромбинового времени на 15%. Применение экстракта левзеи вызвало увеличение показателей продол­жительности свертывания крови: время начала свертывания – на 27%, про­должительности – на 69% и конца свертывания – на 53% по сравнению с жи­вотными не получавшими лечения. АЧТВ во всех исследуемых группах жи­вотных достоверно не изменялось (табл. 8, рис 7).

При артериальной гипертензии весьма важным фактором тромбообразования является состояние эндотелия сосудов [151, 180]. В этих условиях снижается способность эндотелия синтезировать противосвертывающие и фибринолитические вещества (активатор плазминогена, простациклин) и инактивировать прокоагулянтные агенты [146, 208]. Повышение антиагрегантной активности сосудистой стенки под действием экстрактов левзеи и лихниса свидетельствует об их благоприятном действии на эндотелиальные клетки, восстанавливающем не только антитромбоцитарный, но и антикоагуляционный эффект эндотелия. Следствием такого действия исследуемых экс­трактов явилось повышение времени свертывания крови у гипертензивных крыс.

Кроме влияния, опосредованного через тромбоцитарно-сосудистые эф­фекты, на наш взгляд, нельзя исключить и возможного прямого воздействия экстрактов на плазменный гемостаз. Этот эффект может быть обусловлен флавоноидной фракцией, поскольку известно, что многие флавоноиды обла­дают способностью ингибировать НАД Н-эпоксидредуктазу [210], уменьшая, тем самым, активацию факторов свертывания крови в печени.

Таким образом, экстракты левзеи лихниса при их курсовом введении спо­собствуют снижению гиперкоагуляционной активности крови у спонтанно гипертензивных крыс за счет уменьшения активности сосудисто- тромбоцитарного и плазменного звеньев гемостаза.

 

Таблица 8

Влияние курсового (14 дней) введения экстрактов лихниса и левзеи (150 мг/кг внутрижелудочно) на
протромбиновое время (ПТ, сек), активированное частичное тромбопластиновое время (АЧТВ, сек),
время начала, продолжительности и конца свертывания (Т) Т₂,Т₃, сек)
у спонтанно гипертензивных крыс (Х±ш)

Условия опыта	ПТ	АЧТВ	т,	т2	Т3
Крысы Вистар п=6	15,6±0,4	13,3±0,8	3\±2	82±6	110±6
Контроль (крысы линии БЫК.) п=6	15,1 ±0,3	13,2±0,4	26±1[4]	71 ±2*	98±3*
Экстракт лихниса п=6	17,3±0,8*#	13,5±0,3	44±3*#	113±15*#	164±20*#
Экстракт левзеи п=6	15,2±0,4	14,0±0,7	33±9п	120±20#	150±21#

Примечание: * – р<0,05 по сравнению со значениями у крыс Вистар , – р<0,05 по сравнению с контролем

 

3.1.4. Изучение спектра антиагрегантной активности экстрактов левзеи и лихниса в условиях in vitro

Важным моментом повышения тромбогенного потенциала крови при инфаркте миокарда, ишемии мозга и артериальной гипертензии является ак­тивация тромбоцитов, возникающая как спонтанно, так и под действием раз­личных индукторов агрегации [30, 118, 119].

Поскольку активация и агрегация тромбоцитов происходит под действи­ем большого числа физиологических агонистов, отличающихся друг от друга химической структурой и «точкой приложения» на кровяных пластинках, при изучении новых антиагрегантных средств и для контроля над эффектив­ностью проводимой антиагрегантной терапии необходимо проводить иссле­дование активности тромбоцитов в ответ на различные индукторы [15]. В на­стоящее время для диагностики большинства тромбоцитопатий, а также для анализа действия антитромбоцитарных средств чаще всего используют такие индукторы как АДФ, коллаген, ристомицин, тромбин [15, 18].

Основой взаимодействия тромбоцитов с практически любыми индукто­рами агрегации считается их связывание со специализированными рецепто­рами, локализованными на внешней поверхности мембраны. Не исключено, что проагреганты влияют на тромбоциты посредством сразу нескольких мембранных механизмов [6].

В наших исследованиях при изучении спектра антиагрегантной активно­сти исследуемых экстрактов в опытах in vitro в качестве индукторов агрега­ции применялись тромбин, коллаген и арахидоновая кислота, in vivo – АДФ.

Тромбин и коллаген являются сильными физиологическими агонистами, которые при взаимодействии со специфическими рецепторами вызывают все физиологические ответы тромбоцитов: изменение формы клеток, их агрега­цию и секрецию [57]. Под действием тромбина и коллагена происходит весьма значительное увеличение выработки ТхА₂, фактора активации тром­боцитов, мобилизация внутриклеточного кальция [6, 30].

В нашем исследовании при использовании тромбина в качестве агреги­рующего агента преинкубация богатой тромбоцитами плазмы с экстрактом лихниса достоверно уменьшала степень агрегации тромбоцитов на 20% по сравнению с контролем. Экстракт левзеи снижал тромбин-индуцированную агрегационную активность тромбоцитов на 36% по сравнению с контроль­ными значениями (табл. 9, рис. ,8). Способность экстрактов лихниса и левзеи снижать тромбин-индуцированную агрегацию кровяных пластинок является важным звеном в суммарном механизме антикоагуляционного действия ис­следуемых экстрактов, поскольку тромбин является не только фактором аг­регации тромбоцитов, но и продуктом плазменного коагуляционного каскада свертывания крови [18].

Таблица 9

Влияние экстрактов лихниса и левзеи (в конечной концентрации 1 х 10~⁵ г/мл плазмы) на
амплитуду агрегации тромбоцитов (А, %), стимулированных’ тромбином (0,3 ЕД/мл),
коллагеном (50 мкг/мл), арахидоновой кислотой (3,3×10″⁷ М) в опытах in vitro (X±m)

Условия опыта	Тромбин	Коллаген	Арахидоновая кислота
Контроль п—6	59±3,7	32±6,0	46±10,0
Экстракт лихниса п=6	47±3,5*	22 ±6,0	21±5,6*
Экстракт левзеи п=6	38±8,2*	18±3,5*	25±5,7*

Примечание: * – р<0,05 по сравнению с контролем

 

Преинкубация богатой тромбоцитами плазмы с экстрактом левзеи сни­жала коллаген-индуцированную агрегацию тромбоцитов на 44% по сравне­нию с контрольными значениями. Использование экстракта лихниса в этих же условиях выявило тенденцию к снижению агрегационной активности кровяных пластинок (табл. 9, рис. 8). Подавление коллаген-индуцированной агрегации тромбоцитов исследуемыми экстрактами свидетельствует об их способности ослаблять ключевой момент в активации гемостаза – взаимо­действие с коллагеном эндотелия [57, 118].

Инкубация богатой тромбоцитами плазмы с экстрактами лихниса и лев- зеи при использовании в качестве индуктора агрегации арахидоновой кисло­ты оказывала выраженное влияние на функциональную активность тромбо­цитов, уменьшая агрегацию кровяных пластинок на 54% и 46% соответст­венно по сравнению с контрольными значениями (табл.9, рис. 8).
Рис. 8. Влияние экстрактов лихниса и левзеи на амплитуду агрегации тром­боцитов, стимулированных тромбином (1), коллагеном (2), арахидоновой ки­слотой (3) в опытах in vitro.

Уровень агрегации тромбоцитов у контрольных животных принят за 100%. * – р<0,05 по сравнению с контролем

Кроме того, в опытах in vivo на различных моделях сердечно-сосудистой патологии (ишемия мозга и сердца, артериальная гипертензия) отмечено ос­лабление экстрактами лихниса и левзеи агрегации тромбоцитов в ответ на важнейший физиологический индуктор – АДФ (табл. 1, 3, 6). АДФ в зависи­мости от концентрации способен вызывать обратимую, реализуемую через специфические рецепторы, и необратимую, связанную с мобилизацией внут­риклеточного кальция, агрегацию тромбоцитов [6, 169]. Одним из возмож­ных механизмов подавления исследуемыми экстрактами АДФ- индуцированной агрегации тромбоцитов является их способность улучшать функциональное состояние эндотелия сосудистой стенки (табл. 7), поскольку на внутренней поверхности эндотелиальных клеток располагается АДФ-аза – фермент, который расщепляет АДФ [25, 146, 204].

Анализируя полученные результаты, следует отметить, что экстракты лихниса и левзеи способны ослаблять агрегацию тромбоцитов в ответ на раз­личные физиологические агонисты: АДФ, тромбин, коллаген, арахидоновую кислоту, оказывающие свое действие через различные сигнальные системы в клетке. Это свидетельствует о неспецифическом характере антиагрегантной активности исследуемых экстрактов, которая, вероятно, реализуется не через рецепторные механизмы, а воздействием на структуру мембран тромбоцитов, эндотелия. Результатом такого влияния является изменение чувствительно­сти рецепторов тромбоцитов к индукторам различной природы и повышение антиагрегантной активности сосудистой стенки.

 

3.2.
Влияние экстрактов левзеи и лихниса
на агрегацию тромбоцитов и свертывающую активность крови
в условиях истощающей физиче­ской нагрузки

Физическая нагрузка достаточной мощности и длительности, как прави­ло, вызывает выраженные сдвиги различных параметров системы гемостаза [34, 114, 205], приводит к нарушениям реологических свойств крови [11, 87, 236]. Развитие утомления при дозированной физической нагрузке коррелиру­ет с изменениями гемореологии, коагуляционной и фибринолитической ак­тивности [34, 84, 85, 177]. Возможным механизмом зависимости физической работоспособности от степени нарушения указанных параметров является ухудшение кислородтранспортных возможностей организма [43], а также возможность микротромбообразования, что может привести к непредвиди­мым тромботическим осложнениям [88].

Повышение агрегационной активности тромбоцитов отмечено в экспе­риментах при однократной велоэргометрической нагрузке большой интен­сивности у мужчин [36]. Физическая нагрузка у спортсменов на тредбане до отказа от выполнения работы вызывала резкое повышение коагуляционного потенциала по данным тромбоэластографии, увеличение концентрация фиб­риногена и фактора XIII, снижение фибринолиза [88]. Полагают, что в этот период повышение свертываемости крови и снижение фибринолиза расцени­вается как защитная реакция организма на стрессорные воздействия [88].

Важным звеном в формировании ответной реакции системы гемостаза на мышечную деятельность являются клетки крови – преимущественно тромбоциты [176, 231] и эритроциты [84, 85].

В наших исследованиях нагрузка при беге на тредбане до полного физи­ческого утомления крыс вызывала изменение ряда тромбоцитарных и коагу- ляционных параметров крови, по сравнению с показателями интактных жи­вотных: отмечен рост агрегации тромбоцитов на 46% (табл. 10, рис. 9), уменьшение времени начала, продолжительности и конца свертывания на 17%, 41% и 31% соответственно. Протромбиновое время и АЧТВ в этих ус­ловиях достоверно не изменялись (табл. 11, рис. 9).

Следовательно, истощающая физическая нагрузка при беге на тредбане вызывала изменение функциональной активности тромбоцитов и коагуляционных свойств крови у крыс, что выражалось в увеличении агрегации тром­боцитов и гиперкоагуляции крови.

Интенсивная физическая нагрузка по-разному влияет на гемостаз и рео­логические свойства крови у людей – нетренированных и при постоянной физической нагрузке [11, 34]. Такая же закономерность отмечена и в экспе­риментах на животных [222]. Так, в опытах на крысах, которые подвергались острой истощающей нагрузке – бег на тредбане, структурные и функцио­нальные (нарушение деформируемости) изменения в эритроцитах и повыше­ние уровня ТБК-активных продуктов в крови наблюдалось только у нетрени­рованных, так называемых “сидячих крыс”, и не отмечены у животных, ко­торые подвергались регулярной тренировке в течение месяца. Отмеченные различия связаны с тем, что интенсивная физическая нагрузка резко увели­чивает сдвиговое напряжение, что приводит к временному повышению вяз­кости крови, но одновременно стимулирует продукцию N0, простациклина эндотелием сосудистой стенки, которые вызывают вазодилятацию и способ­ствуют приведению коагуляционных и гемореологических параметров к ис­ходным значениям [228], т.е. эндотелий выполняет регулирующую функцию. Резкая интенсивная физическая нагрузка у нетренированных людей вызывает окислительный стресс, в условиях которого эндотелий утрачивают свою ре­гулирующую роль за счет того, что супероксидный радикал инактивирует N0, продуцируемый эндотелием в ответ на сдвиговое напряжение, возни­кающее при физической нагрузке с образованием пероксинитритов, которые в свою очередь разлагаются на такие свободные радикалы как ОН и МЭ₂ [142, 206, 221]. Цепные свободнорадикальные реакции оказывают цитоток- сическое действие на эндотелий, клетки крови и сдвигают баланс в сторону вазоконстрикции, агрегации тромбоцитов и гемокоагуляции [235]. Кроме то­го, усиленное образование липидных перекисей в тромбоцитах способствует аккумуляции внутриклеточного Са²⁺, подавлению активности аденилатцик- лазы с уменьшением концентрации цАМФ, модуляции активности рецептор- ных белков и функции сократительного аппарата кровяных клеток [155].

В связи с этим, важным направлением повышения выносливости при физической нагрузке у людей с различными сердечно-сосудистыми заболе­ваниями, а также увеличения работоспособности при истощающей физиче­ской нагрузке, в частности в спортивной медицине, может быть применение препаратов растительного происхождения, не относящихся к допинговым средствам, способных оказывать нормализующее действие на тромбоцитарнокоагуляционный потенциал и реологические параметры крови.

 

Таблица 10

Влияние курсового (14 дней) введения экстрактов лихниса и левзеи (150 мг/кг внутрижелудочно) на
АДФ-индуцированную агрегацию тромбоцитов (А, %) у крыс после физической нагрузки при беге на тредбане (Х±ш)

Интактные животные п=6	Контроль п=6	Экстракт лихниса п=6	Экстракт левзеи п=6
28±1,9	41±2,6[5]	33±2,5#	38±5,3

Примечание: * – р<0,05 по сравнению со значениями у интактных животных;

* – р<0,05 по сравнению с контролем

Применение экстракта лихниса в течение 14 дней до интенсивной физи­ческой нагрузки, вызывало у крыс снижение агрегации тромбоцитов на 20%, по сравнению с контролем, без существенных изменений других показателей свертывающей системы крови (табл. 10, 11, рис. 9). После курсового введе­ния экстракта левзеи достоверных изменений гемостазиологических показа­телей по сравнению с контрольной группой не наблюдалось (табл. 10, 11,рис. 9).

Антиагрегантное действие экстракта лихниса в условиях нагрузки бегом до истощения, вероятно, обусловлено его антиоксидантными свойствами [27, 101]. Как известно, ингибирование процессов перекисного окисления липи- дов нормализует реологические свойства крови, способствуя улучшению микроциркуляции [101]. Предварительное назначение витаминов- антиоксидантов (витамины С и Е) крысам в течении месяца также устраняло накопление ТБК-активных продуктов и нарушение деформируемости эрит­роцитов, вызванных однократной физической нагрузкой [222]. При примене­нии экстракта лихниса эндотелий сосудов испытывает меньшие механиче­ские воздействия со стороны эритроцитов, степень “ригидности” которых под воздействием антиоксидантной защиты снижается, что уменьшает веро­ятность повреждения эндотелия сосудистой стенки и активации тромбоци­тов. Однако следует отметить слабое защитное действие исследуемых экс­трактов на свертывающую систему крови при экстремальной физической на­грузке по сравнению с их эффектами в условиях моделей сердечно­сосудистых заболеваний. Возможно, это связано с тем, что при моделирова­нии сердечно-сосудистых заболеваний экстракты левзеи и лихниса вводили уже на фоне воспроизведенных патологических состояний и препараты пре­пятствовали развитию механизмов, участвующих в активации свертывающей системы крови. В случае же применения экстрактов при физической нагруз­ке, их курсовое введение осуществлялось интактным животным, которые за­тем подвергались однократной истощающей нагрузке бегом. Вероятно, на­значение экстрактов левзеи и лихниса здоровым животным не оказывает влияния на тромбоцитарный и коагуляционный потенциал крови и, в связи с этим, не препятствует формированию гиперкоагуляционного синдрома при предъявлении однократной экстремальной физической нагрузки крысам.

 

Таблица 11

Влияние курсового (14 дней) введения экстрактов лихниса и левзеи (150 мг/кг внутрижелудочно) на
протромбиновое время (ПТ, сек), активированное частичное тромбопластиновое время (АЧТВ, сек),
время начала, продолжительности и конца свертывания (Т_ь Т₂, Тз, сек) у крыс
после физической нагрузки при беге на тредбане (Х±ш)

Условия опыта	ПТ	АЧТВ	Tj	Т2	т3
Интактные животные п—6	18,8±2,6	16,3±0,6	100±5	140±6	240±8
Контроль п=6	15,0±0,9	17,3±1,3	83±2*	82±14*	165±15*
Экстракт лихниса п=6	15,4±0,5	17,6±0,8	84±5*	76±10*	160±12*
Экстракт левзеи п=6	15,3±1,0	18,1±0,6	84±2*	96±14*	180±18*

 

Примечание: * – р<0,05 по сравнению со значениями у интактных животных;  – р<0,05 по сравнению с контролем под воздействием антиоксидантной защиты снижается, что уменьшает веро­ятность повреждения эндотелия сосудистой стенки и активации тромбоци­тов.

 

Содержание:

• Диссертация О.А. Федина “Влияние экстрактов левзеи сафлоровидной и лихниса хальцедонского на показатели системы гемостаза в условиях различных  моделей гиперкоагуляционного синдрома у крыс”. Оглавление
• Диссертация О.А. Федина “Влияние экстрактов левзеи сафлоровидной и лихниса хальцедонского на показатели системы гемостаза в условиях различных  моделей гиперкоагуляционного синдрома у крыс”. Введение
• Диссертация О.А. Федина “Влияние экстрактов левзеи сафлоровидной и лихниса хальцедонского на показатели системы гемостаза в условиях различных  моделей гиперкоагуляционного синдрома у крыс”. Глава I
• Диссертация О.А. Федина “Влияние экстрактов левзеи сафлоровидной и лихниса хальцедонского на показатели системы гемостаза в условиях различных  моделей гиперкоагуляционного синдрома у крыс”. Глава II
• Диссертация О.А. Федина “Влияние экстрактов левзеи сафлоровидной и лихниса хальцедонского на показатели системы гемостаза в условиях различных  моделей гиперкоагуляционного синдрома у крыс”. Глава III
• Диссертация О.А. Федина “Влияние экстрактов левзеи сафлоровидной и лихниса хальцедонского на показатели системы гемостаза в условиях различных  моделей гиперкоагуляционного синдрома у крыс”. Заключение
• Диссертация О.А. Федина “Влияние экстрактов левзеи сафлоровидной и лихниса хальцедонского на показатели системы гемостаза в условиях различных  моделей гиперкоагуляционного синдрома у крыс”. Выводы