Министерство здравоохранения РФ
Рязанский государственный медицинский
университет имени академика И.П.Павлова
Автор:
БУРМИСТРОВА ЛИЛИЯ АЛЕКСАНДРОВНА
Диссертация
«ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ И БИОХИМИЧЕСКАЯ
ОЦЕНКА БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ
ТРУТНЕВОГО РАСПЛОДА»
Содержание
Глава 3. Часть 2.
3.2.2.
Значения параметров плавательных тестов
и при назначении трутневого расплода
и маточного молочка
Еще одним важным критерием при отборе животных, помимо массы тела, явились значения длительности пробного плавания. Оно проводилось в два этапа. На первом подбиралась масса привязываемого к основанию хвоста груза, с которым крысы плавали не более 200 секунд. Она оказалась в пределах 13-15% от массы тела животных. Далее оставляли только тех животных, которые с 15%-ным грузом смогли проплыть до развития утомления 90-145 секунд. Это позволило максимально стандартизировать исходные значения стартового показателя, то есть создать оптимальные условия для оценки изменений параметров физической работоспособности в процессе реализации многократных плавательных нагрузок и на фоне введения сравниваемых биологически активных продуктов пчеловодства.
Первый тест. Во всех четырех сериях значения продолжительности первичного и повторного плаваний оказались практически идентичными по абсолютной величине. Естественно, что и их производные – суммарная продолжительность двойного плавания (СПДП) и показатель восстановления работоспособности (ПВР) – не имели статистических отличий, а межгрупповые колебания фиксируемых значений составили + 3%.
Второй тест (5-й день эксперимента). Продолжительность выполнения первичной нагрузки крысами серии «плавание» почти сохранилось на уровне исходного параметра, составляя 94% от него (105,6 + 10,6 с). Не было отмечено влияния на данный показатель и оцениваемых продуктов пчеловодства: 112,9 + 4,5 с (101%) – ТР-1, 117,9 + 6,0 с (103%) – ТР-2 и 124,3 + 7,6 с (108%) – ММ. Длительность повторного плавания также не имела достоверных отличий от исходных значений во всех сериях, хотя тенденция к ее увеличению наблюдалась в каждом случае – менее выраженная в сериях «плавание» (87,2 + 6,0 с, или 109%) и «ТР-1 + плавание» (80,7 + 6,8 с, или 104%), более – при введении ТР-2 (93,0 + 6,8 с, или 118%) и маточного молочка (94,3 + 5,3 с, или 117%). Суммарная продолжительность двойного плавания во всех препаратных группах сохранялась в пределах значений близких к показателям крыс, не получавших продукты пчеловодства (ТР-1 – 195,0 + 8,1 с, или 103%; ТР-2 – 209,3 + 12,8 с, или 108%; ММ – 217,9 + 12,1 с, или 114%). Не выявлено существенных изменений и в величинах показателя восстановления работоспособности: он составил в серии «плавание» 83,9 + 7,1%, или 121% от исходного значения, «ММ + плавание» – 76,4 + 3,3%, или 108%, «ТР-1 + плавание» – 71,6 + 6,0%, или 103%, и «ТР-2 + плавание» – 78,7 + 5,2%, или 114%. Как видно, пятидневное введение маточного молочка и различных доз трутневого расплода практически не повлияло на характеристики плавательного теста, что подтверждено статистическим анализом сравнения параметров препаратных серий и серии «плавание».
Третий тест (10-й день эксперимента). На данном этапе произошли более рельефные изменения. Так, введение трутневого расплода в дозе 10 мг/кг способствовало возрастанию продолжительности первичного плавания до 117,1 + 6,8 с (105% от исходной), в дозе 20 мг/кг – до 123,5 + 6,0 с (107%). Более значимо она возросла у крыс, получавших маточное молочко – 143,6 + 6,8 с (125%). Причем, последнее значение уже достоверно превышало исходный параметр в этой группе животных. В серии «плавание» продолжительность первичной нагрузки практически не изменилась с предыдущими этапами (107,9 + 5,3 с, или 96%). Не изменялась в этой группе и продолжительность повторного плавания (77,9 + 3,8 с, или 98% от исходной величины). Достоверное и равновыраженное его увеличение произошло во всех препаратных сериях: «ТР-1 + плавание» – до 134% (104,3 + 6,0 с), «ТР-2+плавание» – до 132% (103,6 + 6,8 с), «ММ + плавание» – до 134% (104,3 + 6,0 с). Вполне естественно, что и СПДП возросла после применения продуктов пчеловодства достоверно значимо по сравнению с исходными значениями, но не в одинаковой степени: умеренно – у животных, получавших трутневый расплод в дозе 10 мг/кг (220,0 + 14,3 с, или 117%) и в дозе 20 мг/кг (227,1 + 12,8 с, или 117%); более выражено – после введения маточного молочка (282,9 + 12,8 с, или 148%). А в серии «плавание» он продолжал сохраняться на уровне 1- и 2-го тестов (186,4 + 9,1 с, или 98%). Такой же характер изменений произошел и с величиной показателя восстановления работоспособности: он не изменился у животных серии «плавание» (73,3 + 5,0%), умеренно возрос при введении трутневого расплода в дозе 10 мг/кг (90,1 + 6,3%, или 130% от исходного значения) и в дозе 20 мг/кг (84,1 + 4,9%, или 122%), максимально – в серии «ММ + плавание» (97,6 + 5,0%, или 137%). Сопоставление регистрируемых параметров в препаратных сериях, серии «плавание» и на этом этапе позволили установить достоверность превышения первичного плавания (ММ – 133%), повторного плавания (ТР-1 – 134%, ТР-2 – 133%, ММ – 179%), СПДП (ТР-2 – 122%, ММ – 152%), ПВР (ТР-1 – 123%, ММ – 133%), что является дополнительным подтверждением влияния на состояние физической активности именно назначения продуктов пчеловодства, а не плавательного тренинга.
Итак, результаты третьего плавательного теста свидетельствуют о развитии стимулирующего эффекта исследуемых БАПП, вводимых десятидневным курсом, на физическую работоспособность лабораторных животных, особенно в случае применения маточного молочка. Трутневый расплод оказал несколько меньшее влияние, причем близкое по выраженности в сериях «ТР-1 + плавание» и «ТР-2 + плавание».
Четвертый тест (15-й день эксперимента). На заключительном этапе эксперимента в серии «плавание» отмечено сохранение значений первичного и повторного плаваний близких к исходным (117,1 + 6,0 с, или 105% и 87,1 + 9,1 с, или 109% соответственно. Этим объясняется и отсутствие каких-либо изменений в суммарной продолжительности двойного плавания (205,0 + 10,6 с, или 106%) и показателя восстановления работоспособности (61,3 + 6,0%). Равновыраженный эффект, проявившийся достоверным возрастанием значений всех регистрируемых показателей, отмечен у животных, которым вводили трутневый расплод (продолжительность первичного плавания: 133,6 + 6,8 с, или 120% от исходной в серии «ТР-1 + плавание» и 103,6 + 6,8 с, или 121% – «ТР-2 + плавание»; продолжительность повторного плавания: 104,3 + 6,0 с, или 134% – «ТР-1 + плавание» и 103,6 + 6,8 с, или 132% – «ТР-2 + плавание»; СПДП: 255,0 + 13,5 с, или 135% – «ТР-1 + плавание» и 267,1 + 15,9 с, или 138% – «ТР-2 + плавание»; ПВР: 92,2 + 7,5% – «ТР-1 + плавание» и 91,5 + 3,1% – «ТР-2 + плавание»). Как и на предыдущих этапах, максимальный эффект в сравниваемых сериях проявился у животных, получавших маточное молочко, что выразилось в наиболее высокой продолжительности первичного (165,0 + 9,8 с, или 143%) и повторного (170,0 + 6,0 с, или 210%) плаваний, суммарной продолжительности двойного плавания (355,0 + 15,9 с, или 175%) и показателя восстановления работоспособности (103,6 + 3,4%, или 146% от исходного значения). Вполне естественной оказалась и большая степень возрастания параметров работоспособности по сравнению с серией «плавание». Причем, в большинстве случаев выявленные различия были статистически подтвержденными. Так, продолжительность первичного плавания в сериях «ТР-1 + плавание», «ТР-2 + плавание» и «ММ + плавание» на 14, 21 и 41% превышала таковую в группе «плавание»; продолжительность повторной нагрузки – 39, 45 и 95%; СПДП – на 24, 38 и 64% и ПВР – на 50, 49 и 69%.
В итоге оценки изменений комплекса физиологических показателей лабораторных животных, выполняющих в течении 15 дней четыре двойных плавательных теста, можно констатировать следующее. В серии «плавание» отмечалась стабильность регистрируемых показателей работоспособности практически на всех этапах эксперимента. Это явилось подтверждением отсутствия привыкания крыс к нагрузке или переутомления их из-за чрезмерной частоты выполнения плавательных тестов. Трутневый расплод способствовал увеличению объема выполняемых нагрузок подопытными животными. Это действие достоверно проявилось к 10-му дню введения расплода, то есть к третьему плавательному тесту. Актопротекторный эффект практически не зависел от дозы препарата: большинство параметров имели максимально близкие значения как при введении его в дозе 10 мг/кг, так и в дозе 20 мг/кг. При этом изучаемый эффект оказался несколько менее выраженным, чем при назначении маточного молочка. Подтверждением последнего являются и величины общей продолжительности плавания «до предела» за все четыре нагрузки (табл. 17): “плавание” – 766,3 + 32,9 с, “ТР-1 + плавание ” – 862,9 + 28 с (111% от серии “плавание”), “ТР-2 + плавание” – 897,1 + 43,8 с (116%), “ММ + плавание” – 1031,0 + 28,7 с (133%). При этом, меньший разброс значений данного показателя в группе животных, получавших трутневый расплод в дозе 20 мг/кг способствовал тому, что эта серия, как и серия «ММ + плавание» достоверно отличалась по общему показателю работоспособности от группы «плавание». В свою очередь, эффект маточного молочка, оцениваемый по данному параметру, умеренно, но статистически значимо превышал действие трутневого расплода, назначаемого как в дозе 10 мг/кг (на 16%), так и 20 мг/кг (на 13%). Все первичные полученные данные плавательных тестов, их производные и параметры статистической обработки представлены в таблицах 13-17.
Таблица 13. Продолжительность первичного плавания крыс различных опытных серий
Серии
|
1-й тест
(исходные данные) |
2-й тест
(5-й день) |
3-й тест
(10-й день) |
4-й тест
(15-й день) |
Плавание
М + m, с % исх. Тисх. Рисх. |
112,1+ 4,5 100,0 — — |
105,6 + 10,6 94,2 0,56 >0,05 |
107,9 + 5,3 96,3 0,60 >0,05 |
117,1 + 6,0 104,5 0,67 >0,05
|
ММ+плавание М + m, с %исх. Тисх. Рисх.
%пл Тпл Рпл |
115,3 + 8,3 100,0 — —
102,9 0,34 >0,05 |
124,3 + 7,6 107,8 0,79 >0,05
117,7 1,43 >0,05 |
143,6 + 6,8 124,5 2,64 <0,05
133,1 4,14 <0,01 |
165,0 + 9,8 143,1 3,87 <0,01
140,9 4,17 <0,01
|
ТР-1+плавание М + m, с %исх. Тисх. Рисх.
%пл Тпл Рпл |
111,4 + 5,3 100,0 — —
99,4 0,10 >0,05 |
112,9 + 4,5 101,4 0,22 >0,05
106,9 0,63 >0,05 |
117,1 + 6,8 105,1 0,66 >0,05
108,5 1,07 >0,05 |
133,6 + 9,1 119,9 2,11 <0,05
114,1 1,51 >0,05
|
ТР-2+плавание
М + m, c %исх. Тисх. Рисх.
%к Тпл Рпл |
115,0 + 3,0 100,0 — —
99,4 0,10 >0,05 |
117,9 + 6,0 102,5 0,43 >0,05
111,7 1,01 >0,05 |
123,5 + 6,0 107,4 1,27 >0,05
114,5 1,95 >0,05 |
139,3 + 6,8 121,1 3,27 <0,01
119,0 2,45 <0,05 |
Таблица 14. Продолжительность повторного плавания крыс различных опытных серий
Серии |
1-й тест
(исходные данные) |
2-й тест
(5-й день) |
3-й тест
(10-й день) |
4-й тест
(15-й день) |
Плавание
М + m, с % исх. Тисх. Рисх. |
79,7+ 4,5 100,0 — — |
87,2 + 6,0 109,4 1,00 >0,05 |
77,9 + 3,8 97,7 0,31 >0,05 |
87,1 + 9,1 109,3 0,73 >0,05
|
ММ +плавание М + m, с %исх. Тисх. Рисх.
%пл Тпл Рпл |
80,9 + 5,3 100,0 — —
101,5 0,17 >0,05 |
94,3 + 5,3 116,6 1,79 >0,05
108,1 0,89 >0,05 |
139,3 + 7,8 172,2 6,19 <0,001
178,8 7,08 <0,001 |
170,0 + 6,0 210,1 11,13 <0,001
195,2 7,61 <0,001
|
ТР-1 + плавание М + m, с %исх. Тисх. Рисх.
%пл Тпл Рпл |
77,9 + 8,3 100,0 — —
97,7 0,19 >0,05 |
80,7 + 6,8 103,6 0,26 >0,05
92,5 0,72 >0,05 |
104,3 + 6,0 133,9 2,58 <0,05
133,9 3,72 <0,05 |
121,4 + 7,6 155,8 3,87 <0,01
139,4 2,89 <0,05
|
ТР-2 + плавание М + m, c %исх. Тисх. Рисх.
%пл Тпл Рпл |
78,6 + 5,3 100,0 — —
98,6 0,16 >0,05 |
93,0 + 6,8 118,3 1,67 >0,05
106,6 0,63 >0,05 |
103,6 + 6,8 131,8 2,90 <0,05
133,0 3,30 <0,01 |
126,4 + 7,6 160,8 5,16 <0,001
145,1 3,31 <0,01 |
Таблица 15. Суммарная продолжительность двойного плавания крыс различных опытных серий
Серии |
1-й тест
(исходные данные) |
2-й тест
(5-й день) |
3-й тест
(10-й день) |
4-й тест
(15-й день) |
Плавание
М + m, с %исх. Тисх. Рисх. |
192,7+ 5,3 100,0 — — |
192,0 + 15,9 99,6 0,04 >0,05 |
186,4 + 9,1 96,7 0,60 >0,05 |
205,0 + 10,6 106,4 1,04 >0,05
|
ММ+плавание М + m, с %исх. Тисх. Рисх.
%пл Тпл Рпл |
196,1 + 10,6 100,0 — —
101,8 0,29 >0,05 |
217,9 + 12,1 113,7 1,63 >0,05
113,5 1,30 >0,05 |
282,9 + 12,8 147,7 5,49 <0,001
151,8 6,14 <0,001 |
355,0 + 15,9 174,8 7,51 <0,001
163,4 6,80 <0,001
|
ТР-1+плавание М + m, с %исх. Тисх. Рисх.
%пл Тпл Рпл |
188,6 + 9,8 100,0 — —
97,9 0,37 >0,05 |
195,0 + 8,1 103,4 0,50 >0,05
101,6 0,17 >0,05 |
220,0 + 14,3 116,7 1,81 >0,05
118,9 1,98 >0,05 |
255,0 + 13,5 135,2 3,98 <0,01
124,4 2,91 <0,05
|
ТР-2+плавание М + m, cек %исх. Тисх. Рисх.
%пл Тпл Рпл |
193,6 + 8,3 100,0 — —
100,5 0,09 >0,05 |
209,3 + 12,8 108,1 1,03 >0,05
109,0 0,85 >0,05 |
227,1 + 12,8 117,3 2,20 <0,05
121,8 2,59 <0,05 |
267,1 + 15,9 138,0 4,10 <0,01
130,3 3,25 <0,01 |
Таблица 16. Показатель восстановления работоспособности крыс различных опытных серий
Серии |
1-й тест
(исходные данные) |
2-й тест
(5-й день) |
3-й тест
(10-й день) |
4-й тест
(15-й день) |
Плавание
М + m, % % исх. Тисх. Рисх. |
69,1+ 4,6 100,0 — — |
83,9 + 7,1 121,4 1,75 >0,05 |
73,3 + 5,0 106,1 0,62 >0,05 |
61,3 + 6,0 88,7 1,03 >0,05
|
ММ+плавание М + m, % %исх. Тисх. Рисх.
%пл Тпл Рпл |
71,1 + 5,4 100,0 — —
102,9 0,28 >0,05 |
76,4 + 3,3 107,5 0,84 >0,05
91,1 0,96 >0,05 |
97,6 + 5,0 137,3 3,60 <0,01
133,2 3,44 <0,01 |
103,6 + 3,4 145,7 5,09 <0,001
169,0 6,13 <0,001
|
ТР-1+плавание М + m, % %исх. Тисх. Рисх.
%пл Тпл Рпл |
69,4 + 6,9 100,0 — —
100,4 0,04 >0,05 |
71,6 + 6,0 103,2 0,24 >0,05
85,3 1,32 >0,05 |
90,1 + 6,3 129,8 2,22 <0,05
122,9 2,09 <0,05 |
92,2 + 7,5 132,9 2,24 <0,05
150,4 3,22 <0,01
|
ТР-2+плавание М + m, % %исх. Тисх. Рисх.
%пл Тпл Рпл |
69,0 + 2,9 100,0 — —
99,9 0,02 >0,05 |
78,7 + 5,2 114,1 1,63 >0,05
93,8 0,59 >0,05 |
84,1 + 4,9 121,9 2,65 <0,05
114,7 1,54 >0,05 |
91,5 + 3,1 132,6 5,30 <0,001
149,3 4,47 <0,001 |
Таблица 17. Значения общего показателя работоспособности по итогам четырех плавательных тестов в различных опытных сериях
Серии
|
Общий показатель
работоспособности |
Плавание
M + m, с |
766,3 + 32,9
|
ММ + плавание
M + m, с %пл Тпл Рпл |
1031 + 28,7 132,8 5,85 <0,001 |
ТР-1 + плавание M + m, с %пл Тпл Рпл %мм+пл Тмм+пл Рмм+пл |
862,9 + 28,7 111,2 1,98 >0,05 83,6 4,16 < 0,01 |
ТР-2 + плавание M + m, с %пл Тпл Рпл %мм Тмм Рмм %тр-1+пл Ттр-1+пл Ртр-1+пл |
897,1 + 43,8 115,6 2,21 <0,05 86,9 2,57 <0,05 104,0 0,65 >0,05
|
3.2.3.
Оценка показателей газового состава
и кислотно-щелочного
равновесия крови
Интенсивные физические нагрузки связаны с резким возрастанием потребления кислорода, активацией метаболизма, что, с высокой вероятностью, должно отражаться на состоянии газового состава и кислотно-щелочного равновесия
крови. Это и определило необходимость регистрации комплекса соответствующих показателей у крыс различных опытных серий: концентрации гидрокарбонатного (НСО3-) аниона, парциального давления кислорода (рО2) и двуокиси углерода (рСО2), значений рН. Взятие крови из брюшной аорты проводили непосредственно после последнего плавательного теста. В отличие от физиологической части работы здесь была включена еще одна группа сравнения – интактные животные (или контроль), которые не подвергались плавательным тестам, но содержались в стандартных условиях вивария, как и “плавающие” крысы. Их показатели – рО2 – 6,87 + 0,39 кПа, рСО2 – 16,5 + 1,1 кПа, НСО3-ион – 49,1 + 1,9 ммоль/л и рН – 7,429 + 0,018 – полностью соответствовали нормальным значениям для данного вида лабораторных животных. В серии “плавание” был отмечен высокодостоверный сдвиг величин всех четырех параметров (табл. 18): парциальное давление кислорода снизилось до 2,89 + 0,37 кПа (42% от контрольного уровня), концентрация НСО3 -иона – до 28,4 + 1,5 ммоль/л (58%), рН – до 6,856 + 0,015 (92%), рСО2 возросла до 28,4 + 1,0 кПа (172%). Данный профиль изменений является вполне характерным для утомления, вызванного интенсивной физической нагрузкой, сопровождающейся при декомпенсации развитием ацидоза, гипоксией, гиперкапнией и дефицитом гидрокарбонатного аниона.
У животных, получавших в течении опытного периода маточное молочко, определяемые показатели также статистически отличались от контрольных, но, в свою очередь, все они были достоверно ближе к значениям интактных животных, чем параметры в серии «плавание»: рО2 – 5,53 + 0,39 кПа (81% от контроля), рСО2 – 20,8 + 1,0 кПа (126%), НСО3 -ион – 39,7 + 1,5 ммоль/л (81%), рН – 7,075 + 0,036 (95%). В случаях назначения трутневого расплода степень протективного эффекта, то есть устойчивости регистрируемых показателей к интенсивности мышечным нагрузкам, была менее выраженной, хотя и здесь как при введении его в дозе 10 мг/кг (рО2 – 3,77 + 0,40 кПа, или 55% от контроля; рСО2 – 22,0 + 1,3 кПа, или 133%; НСО3 -ион – 36,1 + 1,4 ммоль/л, или 74%; рН – 6,968 + 0,032, или 94%), так и дозе 20 мг/кг (рО2 – 3,86 + 0,42 кПа, или 56%; рСО2 – 22,5 + 0,8 кПа, или 136%; НСО3 -ион – 35,1 + 1,6 ммоль/л, или 72%; рН – 6,961 + 0,015, или 94%) отмечен достоверно меньший сдвиг абсолютных значений большинства показателей по сравнению с животными, не получавшими продуктов пчеловодства. Это можно рассматривать, как дополнительное проявление умеренного актопротекторного действия расплода в условиях использованной экспериментальной модели. Статистическим подтверждением различий выраженности повышения устойчивости организма к гипоксии, вызываемой интенсивной физической нагрузкой, явились результаты межгруппового сопоставления показателей газового состава и кислотно-щелочного равновесия. Они свидетельствуют о достоверном превышении протекторного эффекта маточного молочка по сравнению с трутневым расплодом, назначаемым как в дозе 10 мг/кг, так и 20 мг/кг. Действие трутневого расплода оказалось практически идентичным в обеих сериях («ТР-1 + плавание» и «ТР-2 + плавание»), независящим от дозы.
Таблица 18. Показатели газового состава и кислотно-щелочного баланса крови у крыс
контрольной и опытной серий после четырех плавательных тестов
Показатели
Серии |
рО2
(кПа) |
рСО2
(кПа) |
НСО3-ион
(ммоль/л) |
рН |
Контроль
M + m
|
6,87 + 0,39
|
16,5 + 1,1 |
49,1 + 1,9 |
7,429 + 0,018 |
Плавание
М + m %к Тк Рк |
2,89 + 0,37 42,1 7,40 <0,001 |
28,4 + 1,0 126,1 5,42 <0,001 |
28,4 + 1,5 57,8 8,55 <0,001 |
6,856 + 0,015 92,29 24,46 <0,001 |
ММ+плавание
М + m %к Тк Рк %пл Тпл Рпл |
5,53 + 0,39 80,5 2,43 <0,05 191,3 4,91 <0,001 |
20,8 + 1,0 126,1 2,89 <0,05 73,2 3,54 <0,01 |
39,7 + 1,5 80,9 3,88 <0,01 139,8 5,33 <0,001 |
7,075 + 0,036 95,23 8,79 <0,001 103,19 5,61 <0,001 |
ТР-1+плавание
М + m %к Тк Рк %пл Тпл Рпл %мм+пл Тмм+пл Рмм+пл |
3,77 + 0,40 54,9 5,55 <0,01 130,5 1,62 >0,05 68,2 3,15 <0,01 |
22,0 + 1,3 133,3 3,23 <0,01 77,5 2,78 <0,05 105,8 0,73 >0,05 |
36,4 + 1,4 74,1 5,38 <0,001 128,2 3,90 <0,01 91,7 1,61 >0,05 |
6,968 + 0,032 93,79 12,56 <0,001 101,63 3,17 <0,01 98,49 2,22 <0,05 |
ТР-2+плавание
М + m %к Тк Рк %пл Тпл Рпл %мм+пл Тмм+пл Рмм+пл |
3,86 + 0,42 56,2 5,25 <0,001 133,6 1,7 >0,05 69,8 2,91 <0,05 |
22,5 + 0,8 136,4 4,41 >0,001 79,2 2,86 <0,05 108,2 1,33 >0,05 |
35,1 + 1,6 71,5 5,64 <0,001 123,6 3,05 <0,01 88,4 2,10 <0,05 |
6,961 + 0,015 93,70 19,97 <0,001 101,53 4,95 <0,001 98,39 2,92 <0,05 |
Примечание. В этой и последующих таблицах этого раздела символами «%к., Тк., Рк обозначены статистические параметры изменений по сравнению с серией «контроль».
3.2.4.
Биохимические параметры
сыворотки крови в контрольной группе
и после выполнения подопытными
животными цикла плавательных тестов
В сыворотке, полученной после центрифугирования цельной крови в течении 15 минут при 3000 об/мин, проводили определение некоторых метаболитов, характеризующих состояние белкового, углеводного и липидного обменов – концентрации общего белка, глюкозы, холестерина и общих липидов, а также уровень одного из глюкокортикостероидов – кортизола. У интактных крыс значения общелабораторных показателей находились в диапазоне видовой нормы: общий белок – 56,6 + 2,0 г/л; глюкоза – 6,84 + 0,53 ммоль/л; холестерин – 1,40 + 0,09 ммоль/л; общие липиды – 2,57 + 0,20 ммоль/л (табл. 19, 20). В серии «плавание», то есть у животных, не получавших при выполнении цикла плавательных тестов продукты пчеловодства, произошло статистически достоверное увеличение концентрации общего белка до 11% от кон трольной величины (62,7 + 1,9 г/л), глюкозы – до 123% (8,44 + 0,53 ммоль/л), холестерина – до 128% (1,79 + 0,08 ммоль/л), общих липидов – до 126% (3,23 + 0,20 ммоль/л). Эти изменения, вероятнее всего, отражают интенсификацию синтетических процессов, связанную с регулярно выполняемыми физическими нагрузками, требующими более высокого уровня энергетического и пластического обеспечения организма. Курсовое назначение трутневого расплода в дозе 10 мг/кг сопровождалось еще более выраженным возрастанием уровня глюкозы (8,54 ±0,23 ммоль/л, или 125% от контроля), общего белка (68,2 ± 1,1 г/л, или 121%), холестерина (2,29 ± 0,21 ммоль/л, или 164%) и общих липидов (3,98 ± 0,21 ммоль/л, или 155%). Почти в такой же степени изменились эти показатели в серии «ТР-2+плавание» (глюкоза – 8,43 ± 0,30 ммоль/л, или 123%; общий белок – 70,6 ± 1,9 г/л, или 125%; холестерин – 2,13 ± 0,18 ммоль/л, или 152% и общие липиды – 4,03 ± 0,23 ммоль/л, или 157%). Учитывая корреляцию метаболической динамики с ростом физиологических параметров работоспособности животных в этих случаях, вполне реальным является предположение о наличии анаболического эффекта у трутневого расплода, обеспечивающего реализацию актопротекторного действия. Подтверждением этого явились данные статистического анализа о достоверном превышении уровней общего белка, холестерина и общих липидов в сериях где применяли трутневый расплод по сравнению с животными группы «плавание». Наконец, в пользу этого свидетельствуют и максимальные значения концентрации определяемых метаболитов в случае, когда плавательные тесты проводили на фоне введения маточного молочка (глюкоза – 9,51 + 0,42 ммоль/л, или 139% от контроля; общий белок – 74,3 + 1,7 г/л, или 131%; холестерин – 2,97 + 0,09 ммоль/л, или 212%; общие липиды – 4,69 + 0,08 ммоль/л, или 183%). Причем и здесь практически все биохимические показатели достоверно превышали не только соответствующие значения серии «плавание», но и серий «ТР-1 + плавание» и «ТР-2 + плавание».
Достаточно отчетливые изменения в крови различных групп плавающих крыс произошли и по концентрации кортизола – одного из глюкокортикостероидных гормонов, вырабатываемого корковым слоем надпочечников (табл.21). Его уровень в серии «плавание» (36,4 + 3,1 нмоль/л) почти в 2,5 раза превысил показатель контрольной группы. Это можно расценивать как проявление хронической стрессовой реакции, которой является плавательная нагрузка, или маркером развивающейся адаптации к ней. Во всех сериях, где вводили исследуемые продукты пчеловодства, был отмечен более низкий уровень данного гормона, чем в серии «плавание», что отражает меньшую степень напряжения основных мобилизационных механизмов, одним из которых является гипофизарно-надпочечниковый, и сохранение достаточно высокого резервного потенциала. При этом концентрация кортизола оказалась близкой по абсолютным значениям как в случаях назначения маточного молочка (21,9 + 3,1 нмоль/л, или 156% от контроля), так и трутневого расплода, назначаемого в дозе 20 мг/кг (20,4 + 1,9 нмоль/л, или 145%). При введении трутневого расплода в дозе 10 мг/кг уровень контролируемого гормона оказался более низким (16,8 + 1,5 нмоль/л, или 119%), но статистически этот показатель не отличался от значений кортизола в других препаратных сериях.
Таблица 19. Концентрации глюкозы и общего белка в сыворотке крови крыс
контрольной и опытных серий после плавательных тестов
Показатели
Серии |
ГЛЮКОЗА
( ммоль/л ) |
ОБЩИЙ БЕЛОК
( г/л ) |
Контроль
М + m
|
6,84 + 0,53 |
56,6 + 2,0 |
Плавание
М + m %к Тк Рк
|
8,44 + 0,23 123,4 2,77 <0,05 |
62,7 + 1,9 110,8 2,21 <0,05 |
ММ + плавание
M + m %к Тк Рк %пл Тпл Рпл
|
9,51 + 0,42 139,0 3,95 <0,01 112,7 2,19 <0,05 |
74,3 + 1,7 131,3 6,74 118,5 4,55 <0,001 |
ТР-1 + плавание
M + m %к Тк Рк %пл Тпл Рпл %мм+пл Тмм+пл Рмм+пл
|
8,54 + 0,23 125,0 2,94 <0,05 101,2 0,31 >0,05 89,8 2,63 <0,05
|
68,2 + 1,1 120,5 5,08 <0,001 108,8 2,51 <0,05 91,8 3,01 <0,01 |
ТР-2 + плавание
M + m %к Тк Рк %пл Тпл Рпл %мм+пл Тмм+пл Рмм+пл |
8,43 + 0,30 123,2 2,61 <0,05 99,9 0,03 >0,05 88,6 2,09 <0,05 |
70,6 + 1,9 124,7 5,07 <0,001 112,6 2,94 <0,05 95,0 1,45 >0,05 |
Таблица 20. Концентрации холестерина и общих липидов в сыворотке крови
крыс контрольной и опытных серий после плавательных тестов
Показатели
Серии |
ХОЛЕСТЕРИН
( ммоль/л ) |
ОБЩИЕ ЛИПИДЫ
( ммоль/л ) |
Контроль
М + m |
1,40 + 0,09 |
2,57 + 0,20 |
Плавание
М + m % к Тк Рк
|
1,79 + 0,08 127,9 3,24 <0,01 |
3,23 + 0,20 125,7 2,33 <0,05 |
ММ + плавание
M + m %к Тк Рк %пл Тпл Рпл
|
2,97 + 0,09 212,1 12,33 <0,001 165,9 9,80 <0,001 |
4,69 + 0,08 182,5 9,84 145,2 6,78 <0,001 |
ТР-1 + плавание
M + m %к Тк Рк %пл Тпл Рпл %мм+пл Тмм+пл Рмм+пл
|
2,29 + 0,21 163,6 3,90 <0,01 127,9 2,22 <0,05 77,1 2,98 <0,05
|
3,98 + 0,21 155,3 4,90 <0,001 123,5 2,62 <0,05 85,1 3,11 <0,01 |
ТР-2 + плавание
M + m %к Тк Рк %пл Тпл Рпл %мм+пл Тмм+пл Рмм+пл |
2,13 + 0,18 152,1 3,63 <0,01 119,0 1,73 >0,05 71,7 4,17 <0,01 |
4,03 + 0,23 156,8 4,79 <0,001 124,8 2,63 <0,05 85,6 2,71 <0,05 |
Таблица 21. Концентрация кортизола (нмоль/л) в сыворотке крови крыс
контрольной и опытных серий после четырех плавательных тестов
Серии | КОРТИЗОЛ |
Контроль
M + m |
14,07 + 1,33 |
Плавание
M + m %к Тк Рк |
36,37 + 3,08 258,5 6,65 <0,001 |
ММ + плавание M + m %к Тк Рк %пл Тпл Рпл |
21,93 + 3,07 155,9 2,35 <0,05 60,3 3,32 <0,01 |
ТР-1 + плавание M + m %к Тк Рк %пл Тпл Рпл %мм+пл Тмм+пл Рмм+пл |
16,80 + 1,48 119,4 1,37 >0,05 46,2 5,72 < 0,001 76,6 1,50 >0,05 |
ТР-2 + плавание M + m %к Тк Рк %пл Тпл Рпл %мм+пл Тмм+пл Рмм+пл |
20,44 + 1,91 145,3 2,74 <0,05 56,2 4,40 <0,001 93,2 0,41 >0,05 |
3.2.5.
Изменения концентраций пирувата и гликогена
в тканях миокарда скелетной
мышцы крыс различных опытных серий
Итак, возрастание параметров физиологической работоспособности в препаратных сериях, более выраженное при введении маточного молочка, сопровождалось биохимическими изменениями крови, также неодинаковыми в зависимости от применяемого продукта пчеловодства. Более тонкими характеристиками, лежащими в основе непосредственной реализации мышечной активности, являются показатели углеводного обмена, в частности, уровень пировиноградной кислоты и гликогена в тканях скелетной мышцы и миокарда, которые представлены в таблице 22.
Концентрация гликогена в гомогенате скелетной мышцы в серии «плавание» резко упала до минимального значения – 0,468 + 0,089 мг/г, что составило 19% от контроля. Практически такое же снижение отмечено после введения трутневого расплода как в дозе 10 мг/кг (0,488 + 0,109 мг/г, или 20%), так и 20 мг/кг (0,431 + 0,0077 мг/г, или 17%). Маточное молочко способствовало сохранению достоверно более высокого уровня метаболита – 1,435 + 0,327 мг/г, или 58%. Вполне вероятно, что полученные данные могли быть обусловлены различием в степени интенсификации аэробного окисления глюкозы сравниваемыми продуктами пчеловодства, являющегося важнейшим источником энергии, расходуемой при интенсивной физической нагрузке. Введение трутневого расплода почти не повлияло и на уровень в ткани скелетной мышцы одного из ключевых метаболитов этого процесса – пирувата (10 мг/кг – 383,6 ± 5,6 МЕ/в пробе, или 109% от значения интактных животных; 20 мл/кг – 374,1 ± 2,3 МЕ/в пробе, или 106%) – по сравнению с показателем серии «плавание», в которой он также достоверно превышал контрольное значение, составляя 112% (394,1 + 10,3 МЕ/в пробе) от него. В этих сериях, по всей видимости, энергетическое обеспечение плавательных нагрузок достигалось преимущественно за счет активации относительно малопродуктивного гликолиза. У крыс, получавших маточное молочко, концентрация пирувата дополнительно возросла до 410,0 + 4,2 МЕ/в пробе (116% от контроля). Причем это значение достоверно превышало показатели серий «ТР-1 + плавание» и «ТР-2 + плавание», которые составили 94 и 91% от него соответственно. Аналогичный профиль изменений отмечен и для уровня пировиноградной кислоты в миокарде крыс различных опытных групп: они были максимально близкими в сериях «плавание» (407,7 + 3.9 МЕ/в пробе, или 104%), «ТР-1 + плавание» (403,7 + 4,2 МЕ/в пробе, или 105%) и «ТР-2 + плавание» (411,3 + 3,8 МЕ/в пробе, или 105%), и достоверно большим в серии «ММ + плавание» (418,8 + 3,3 МЕ/в пробе, или 107%).
Таким образом, результаты проведенного исследования по анализу комплекса физиологических и биохимических параметров при выполнении лабораторными животными четырех двойных плавательных тестов позволяют сделать заключение об убедительных доказательствах наличия актопротекторного эффекта у трутневого расплода, как в дозе 10, так и 20 мг/кг, проявившегося как приростом непосредственных параметров работоспособности по сравнению с животными, не получавшими биологически активные продукты пчеловодства, так и биохимическими изменениями характерными для обеспечения данного действия.
Таблица 22. Содержание пирувата и гликогена в ткани миокарда и скелетной мышцы крыс контрольной и опытных серий после четырех плавательных тестов
Показатели
Серии |
ПИРУВАТ
в миокарде (МЕ/в пробе) |
ПИРУВАТ
в скелетной мышце (МЕ/в пробе) |
ГЛИКОГЕН
в скелетной мышце (мг/г) |
Контроль
М + m |
392,9 + 2,7 |
352,7 + 5,7 |
2,479 + 0,462 |
Плавание M + m %к Тк Рк |
407,7 + 3,9 103,8 3,12 <0,01 |
394,1 + 10,3 111,7 3,52 <0,01 |
0,468 + 0,089 18,9 4,27 <0,001 |
ММ + плавание М + m %к Тк Рк %пл Тпл Рпл |
418,8 + 3,3 106,6 6,07 <0,001 102,7 2,17 <0,05 |
410,0 + 4,2 116,3 8,09 <0,001 104,0 1,43 >0,05 |
1,435 + 0,327 57,9 1,84 >0,05 306,6 2,85 <0,05 |
ТР-1 + плавание М + m %к Тк Рк %пл Тпл Рпл %мм+пл Тмм+пл Рмм+пл |
403,7 + 4,2 102,5 2,16 <0,05 99,0 0,70 >0,05 96,4 2,83 <0,05 |
383,6 + 5,6 108,8 3,87 <0,01 97,3 0,90 >0,05 93,6 3,77 <0,01 |
0,488 + 0,109 19,7 4,19 <0,01 104,3 0,14 >0,05 34,0 2,75 <0,05 |
ТР-2 + плавание М + m %к Тк Рк %пл Тпл Рпл %мм+пл Тмм+пл Рмм+пл |
411,3 + 3,8 104,7 3,95 <0,01 100,9 0,66 >0,05 98,2 1,49 >0,05 |
374,1 + 2,3 106,1 3,48 <0,01 94,9 1,90 >0,05 91,2 7,50 <0,001 |
0,431 + 0,077 17,4 4,37 <0,001 92,9 0,31 >0,05 30,0 2,99 <0,05 |