Физико-химический анализ и биохимическая оценка биологической активности трутневого расплода. Глава 3. Часть 4.

Министерство здравоохранения РФ
Рязанский государственный медицинский
университет имени академика И.П.Павлова

Автор:

БУРМИСТРОВА ЛИЛИЯ АЛЕКСАНДРОВНА

Диссертация
«ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ И БИОХИМИЧЕСКАЯ
ОЦЕНКА БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ
ТРУТНЕВОГО РАСПЛОДА»

 

Глава 3. Часть 4.

 

3.3.3.
Данные массаметрии семенников,
семенных пузырьков и предстательной железы
в различные сроки
посткастрационного периода

 

Учитывая высокую анаболическую активность тестостерона и характер его влияния на основные органы-мишени, а также представленные выше данные о значительных колебаниях уровня тестостерона в крови у крыс сравниваемых серий при реализации схемы эксперимента, нами проведена оценка динамики ряда массаметрических показателей – массы тела животных, их семенников, семенных пузырьков, предстательной железы.

При формировании опытных серий на предварительном этапе всех животных распределили по значениям их массы тела максимально равномерно, что обеспечило максимальную близость исходных значений этого показателя во всех группах. В дальнейшем, то есть после кастрации, при различной продолжительности введения маточного молочка и трутневого расплода, масса животных («кастрация»: 5-й день – 170,3 + 11,9 г, или 92% от контроля, 10-й день – 170,4 + 12,8 г, или 92%, 15-й день – 182,7 + 9,8 г, или 98%; «кастрация + ММ»: 5-й день – 179,4 + 6,5 г, или 96%, 10-й день – 166,4 + 8,0 г, или 90%, 15-й день – 187,3 + 8,9 г, или 101%; «кастрация + ТР»: 5-й день – 176,4 + 9,2 г, или 95%, 10-й день – 164,6 + 6,5 г, или 88%, 15-й день – 180,9 + 10,7 г, или 97%) не претерпела сколь-либо значимых  и статистически подтвержденных изменений (табл. 26). Эта стабильность, вероятнее всего, связана с тем, что в опыты были взяты только взрослые крысы, у которых дальнейшего прироста массы в естественных условиях уже не происходит, а анаболический эффект, как правило, проявляется, наоборот, в ситуациях, где имеются резервы роста. Кроме того, отсутствие увеличения массы в сериях, где маточное молочко и трутневый расплод назначали некастрированным крысам (ММ – 183,6 + 11,9 г, или 99%, ТР – 181,9 + 15,3 г, или 98%) подтверждает отсутствие у них прямого анаболического эффекта. У кастрированных крыс, как представлено выше, их действие ограничивалось лишь достижением нормотестостеронемии, что опять-таки не создавало предпосылок к дополнительной стимуляции белково-синтетических реакций.

          Таблица 26.   Масса тела крыс контрольной и опытных серий (г)

 

Срок определения Серии	5-й день	10-й день	15-й день
Контроль 186,1 + 11,5	—	—	—
Интактные + ММ %контр. Тконтр. Рконтр.	— — — —	— — — —	183,6 + 11,5 98,7 0,15 >0,05
Интактные + ТР %контр. Тконтр. Рконтр.	— — — —	— — — —	181,9 + 15,3 97,7 0,22 >0,05
Кастрация %контр. Тконтр. Рконтр.	170,3 + 11,9 91,5 0,96 >0,05	170,4 + 12,8 91,6 0,91 >0,05	182,7 + 9,8 98,2 0,23 >0,05
Кастрация + ММ %контр. Тконтр. Рконтр. %кастр. Ткастр. Ркастр.	179,4 + 6,5 96,4 0,51 >0,05 105,4 0,67 >0,05	156,4 + 8,0 84,0 2,12 <0,05 91,8 0,93 >0,05	187,3 + 8,9 100,6 0,08 >0,05 102,5 0,37 >0,05
Кастрация + ТР %контр. Тконтр. Рконтр. %кастр. Ткастр. Ркастр.	176,4 + 9,2 94,8 0,66 >0,05 103,6 0,41 >0,05	164,6 + 6,5 88,4 164, >0,05 96,6 0,41 >0,05	180,9 + 10,7 97,2 0,34 >0,05 99,0 0,13 >0,05

Масса семенников (табл. 27). На первом этапе (5-й день после тестэктомии) массы сохраненных семенников во всех опытных сериях (“кастрация” – 1,06 + 0,19 г; “кастрация + ММ” – 1,08 + 0,06 г; “кастрация + ТР” – 1,14 + 0,03 г) остались практически на уровне контрольного значения (1,05 + 0,08 г). На 10-й день в препаратных сериях обозначилась слабовыраженная тенденция к увеличению массы яичка (ММ – 1,11 + 0,05 г, или 106% и ТР – 1,11 + 0,06 г, или 106%), в то время, как в серии “кастрация” она сохранилась прежней ( 1,02 + 0,05 г, или 97%). На завершающей стадии опытов, то есть на 15-й день, такая же тенденция к увеличению проявилась у кастрированных крыс, которым не вводили биологически активные продукты пчеловодства (1,18 + 0,06 г, или 112% от контроля). У животных, получавших маточное молочко и трутневый расплод, ее значения (ММ – 1,33 + 0,04 г, или 127%; ТР – 1,31 + 0.05 г, или 125%) уже достоверно превышали контрольный уровень, что можно рассматривать в качестве массаметрического проявления выраженной гиперфункции  оставшегося  семенника, обеспечивающего восстановление нор мального уровня тестостерона.

Изменения массы семенных пузырьков (табл. 28) оказались более выраженными, что, вероятно, можно связать с влиянием меняющегося уровня тестостерона на количество их содержимого. Итак, на 5-й день после удаления семенника у крыс произошло достоверное снижение массы семенных пузырьков до 0,220 + 0,035 г (то есть до 65% от контроля). Назначение биологически активных продуктов пчеловодства пятидневным курсом сопровождалось сохранением практически контрольных значений (ММ – 0,318 + 0,029 г, или 94%; ТР – 0,341 + 0,025 г, или 101%). При этом в обоих случаях отмечена достоверность различия по сравнению с величиной серией “кастрация”. К 10-му дню масса семенных пузырьков оказалась минимальной во всех группах по отношению к другим этапам. Но при этом абсолютные значения (“кастрация” – 0,156 + 0,022 г, или 46%; “кастрация + ММ” – 0,199 + 0,027 г, или 59%; “кастрация + ТР” – 0,240 + 0,040 г, или 71%) свидетельствовали о сохранении пропорциональности в степени изменений этого показателя в сравниваемых сериях. Отражением завершения восстановительного периода к 15-му дню после кастрации явилось увеличение массы семенных пузырьков в серии “кастрация” (0,332 + 0,032 г, или 98%) до контрольного уровня, а его  ускорен-

Таблица 27. Масса семенников крыс в контрольной и опытной сериях (г)

 

Сроки определения Серии	5-й день	10-й день	15-й день
Контроль 1,05 + 0,08	—	—	—
Интактные + ММ %контр. Тконтр. Рконтр.	— — — —	— — — —	1,09 + 0,05 103,8 0,42 >0,05
Интактные + ТР %контр. Тконтр. Рконтр.	— — — —	— — — —	1,12 + 0,14 106,7 0,43 >0,05
Кастрация %контр. Тконтр. Рконтр.	1,06 + 0,10 100,8 0,07 >0,05	1,02 + 0,05 96,7 0,37 >0,05	1,18 + 0,06 112,1 1,23 >0,05
Кастрация + ММ %контр. Тконтр. Рконтр. %кастр. Ткастр. Ркастр.	1,08 + 0,06 102,3 0,24 >0,05 101,5 0,13 >0,05	1,11 + 0,05 105,6 0,60 >0,05 109,1 1,33 >0,05	1,33 + 0,04 126,5 3,03 <0,01 112,7 2,08 <0,05
Кастрация + ТР %контр. Тконтр. Рконтр. %кастр. Ткастр. Ркастр. %ММ ТММ РММ	1,14 + 0,03 108,3 1,01 >0,05 107,4 0,74 >0,05 105,8 0,98 >0,05	1,11 + 0,06 105,2 0,53 >0,05 108,7 1,16 >0,05 99,6 0,05 >0,05	1,31 + 0,05 124,9 2,74 <0,05 111,4 1,67 >0,05 98,7 0,26 >0,05

Таблица 28. Масса семенных пузырьков крыс в контрольной и опытной сериях (г)

 

Срок определения Серии	5-й день	10-й день	15-й день
Контроль 0,338 + 0,030	—	—	—
Интактные + ММ %контр. Тконтр. Рконтр.	— — — —	— — — —	0,336 + 0,022 99,4 0,05 >0,05
Интактные + ТР %контр. Тконтр. Рконтр.	— — — —	— — — —	0,335 + 0,042 105,0 0,33 >0,05
Кастрация %контр. Тконтр. Рконтр.	0,220 + 0,035 65,0 2,55 <0,05	0,156 + 0,022 46,1 4,90 <0,001	0,332 + 0,032 98,2 0,14 >0,05
Кастрация + ММ %контр. Тконтр. Рконтр. %кастр. Ткастр. Ркастр.	0,318 + 0,029 94,1 0,48 >0,05 144,9 2,17 <0,05	0,199 + 0,027 58,8 3,45 <0,01 127,5 1,24 >0,05	0,450 + 0,053 133,0 1,84 >0,05 135,5 1,91 >0,05
Кастрация + ТР %контр. Тконтр. Рконтр. %кастр. Ткастр. Ркастр. %ММ ТММ РММ	0,341 + 0,025 100,8 0,07 >0,05 155,2 2,79 <0,05 107,1 0,59 >0,05	0,240 + 0,040 70,8 1,97 >0,05 153,6 1,84 >0,05 120,5 0,85 >0,05	0,425 + 0,030 125,7 2,03 >0,05 128,0 2,12 <0,05 94,5 0,41 >0,05

ное течение при назначении маточного молочка и трутневого расплода – достаточно выраженной тенденцией к дополнительному приросту массы этого органа (ММ – 0,450 + 0,053 г, или 133% от контроля; ТР – 0,425 + 0,030 г, или 126%).

Во многом схожая динамика была выявлена и по показателям массы предстательной железы (табл. 29). Она достоверно уменьшилась на 5-й день после операции у животных серии “кастрация” до 0,115 + 0,014 г, то есть 68% от контрольного значения (0,169 + 0,018 г). В препаратных серия на этом этапе статистических отличий от контроля не отмечено («кастрация + ММ»- 0,196 + 0,022 г, или 116%; «кастрация + ТР» – 0,205 + 0,023 г, 121%). К 10-ому дню существенно  снизилась  масса железы не только в  серии “кастрация” (0,076 + 0,022 г, или 45%), но и на фоне назначения кастрированным животным маточного молочка (0,114 + 0,019 г, или 68%)  и трутневого расплода(0,130 + 0,020 г, или 77%). Как и для семенных пузырьков, на 15-й день в серии “кастрация” произошло восстановление массы предстательной железы до контрольного уровня. При этом назначаемые продукты пчеловодства способствовали достоверному росту ее массы («кастрация + ММ» – до 0,268 + 0,037 г, или 159% от контроля; «кастрация + ТР» – до 0,283 + 0,026 г, или 168%), что, в свою очередь, определило и достоверность отличий этих показателей от соответствующего параметра серии “кастрация”.

Как видно из представленных прямых массаметрических данных, кастрация крыс сопровождалась гипотрофией семенных пузырьков и предстательной железы в ранние сроки определения и восстановления контрольных значений к 15-му дню. Маточное молочко и трутневый расплод способствовали сохранению их массы на 5-й день после кастрации, меньшей степени гипотрофии – на 10-й день и развитию их гипертрофии – к 15-му дню. Изменения массы семенников отмечены только в препаратных сериях в виде их увеличения также к концу экспериментов. При этом по большинству фиксируемых параметров на каждом этапе посткастрационного периода существенных количественных отличий между сериями животных, которым вводили маточное молочко и трутневый расплод, не отмечено.

 

 

Таблица 29. Масса  представительной  железы крыс  в  контрольной  и опытной  сериях (г)

 

Сроки определения Серии	5-й день	10-й день	15-й день
Контроль 0,169 + 0,018	—	—	—
Интактные + ММ %контр. Тконтр. Рконтр.	— — — —	— — — —	0,163 + 0,013 96,5 0,27 >0,05
Интактные + ТР %контр. Тконтр. Рконтр.	— — — —	— — — —	0,169 + 0,031 100,0 0,00 >0,05
Кастрация %контр. Тконтр. Рконтр.	0,115 + 0,014 67,9 2,37 <0,05	0,076 + 0,022 44,9 3,32 <0,01	0,152 + 0,012 90,1 0,78 >0,05
Кастрация + ММ %контр. Тконтр. Рконтр. %кастр. Ткастр. Ркастр.	0,196 + 0,022 116,0 0,95 >0,05 170,8 3,09 <0,01	0,114 + 0,019 67,5 2,13 <0,05 150,4 1,34 >0,05	0,268 + 0,037 159,0 2,41 <0,05 176,5 2,97 <0,05
Кастрация + ТР %контр. Тконтр. Рконтр. %кастр. Ткастр. Ркастр. %ММ ТММ РММ	0,205 + 0,023 121,3 1,23 >0,05 178,6 3,32 <0,01 104,6 0,28 >0,05	0,130 + 0,020 76,9 1,46 >0,05 171,3 1,84 >0,05 113,9 0,58 >0,05	0,283 + 0,026 167,6 3,65 <0,01 186,0 4,62 <0,001 105,4 0,32 >0,05

3.3.4.
Оценка значений весовых
коэффициентов для семенников,
семенных пузырьков
и предстательной железы

 

Несмотря на отмеченное выше отсутствие существенных изменений массы тела крыс за время проведения экспериментов, тенденция к ним в ряде серий проявилась. Не исключено, что в такой ситуации пропорционально могла измениться и масса контролируемых органов. Поэтому оценка не только абсолютных значений массы, но и производных величин, то есть весовых коэффициентов, являющихся более корректными параметрами массаметрического  анализа, была включена в программу исследования. Кроме того, здесь рассчитывали на дополнительные данные по сравнительной выраженности изучаемого эффекта в зависимости от применяемого биологически активного продукта пчеловодства, так как весовые коэффициенты являются, как правило, более чувствительными характеристиками, чем сама масса органа.

Весовые коэффициенты для семенников (табл. 30). К 5-му дню после односторонней кастрации значения весовых коэффициентов для сохраненных семенников имели более выраженную тенденцию к увеличению во всех опытных сериях (“кастрация” – 0,62 + 0,05, или 110% от контроля; “кастрация + ММ” – 0,60 + 0,03, или 107%; “кастрация + ТР” – 0,65 + 0,03, или 116%), чем при их прямой массаметрии. К 10-му дню в препаратных группах это увеличение уже носило достоверный характер (ММ – 0,71 + 0,04, или 127%; ТР – 0,67 + 0,02, или 119%), тогда как в серии “кастрация” зафиксированное значение осталось на прежнем уровне (0,60 + 0,03, или 107%). На 15-й день и в этой серии весовые коэффициенты возросли статистически значимо до 0,65 + 0,02 (до 115%). У животных, получавших маточное молочко и трутневый расплод, они сохранились на максимально высоком уровне («кастрация + ММ» – 0,71 + 0,02, или 127%; «кастрация + ТР» – 0,73 + 0,03, или 130%).

Весовые коэффициенты для семенных пузырьков (табл. 31). В ранние сроки посткастрационного  периода здесь  получены сравнительные ре-

Таблица 30. Значения весовых коэффициентов для семенников (масса семен-

ника: 1/100 массы тела) крыс в контрольной и опытной  сериях

 

Сроки определения Серии	5-й день	10-й день	15-й день
Контроль 0,56 + 0,02	—	—	—
Интактные + ММ %контр. Тконтр. Рконтр.	— — — —	— — — —	0,60 + 0,02 107,1 1,41 >0,05
Интактные + ТР %контр. Тконтр. Рконтр.	— — — —	— — — —	0,61 + 0,04 108,9 1,12 >0,05
Кастрация %контр. Тконтр. Рконтр.	0,62 + 0,05 110,4 1,09 >0,05	0,60 + 0,03 107,1 1,24 >0,05	0,65 + 0,02 115,0 2,81 <0,05
Кастрация + ММ %контр. Тконтр. Рконтр. %кастр. Ткастр. Ркастр.	0,60 + 0,03 107,4 1,04 >0,05 97,0 0,31 >0,05	0,71 + 0,04 126,9 3,80 <0,01 118,5 2,58 <0,05	0,71 + 0,02 126,9 5,67 <0,001 110,4 2,32 <0,05
Кастрация + ТР %контр. Тконтр. Рконтр. %кастр. Ткастр. Ркастр. %ММ ТММ РММ	0,65 + 0,03 116,0 2,50 <0,05 105,1 0,54 >0,05 108,3 1,11 >0,05	0,67 + 0,02 119,3 3,62 <0,01 111,4 2,00 >0,05 94,0 1,03 >0,05	0,73 + 0,03 130,2 4,89 <0,001 113,3 2,35 <0,05 102,6 0,55 >0,05

Таблица 31. Значения весовых коэффициентов для семенных пузырьков
(масса семенных  пузырьков:  1/1000 массы тела) крыс в контрольной и опытной сериях

Сроки определения Серии	5-й день	10-й день	15-й день
Контроль 1,05 + 0,08	—	—	—
Интактные + ММ %контр. Тконтр. Рконтр.	— — — —	— — — —	1,084 + 0,10 101,7 0,28 >0,05
Интактные + ТР %контр. Тконтр. Рконтр.	— — — —	— — — —	1,92 + 0,10 106,1 0,86 >0,05
Кастрация %контр. Тконтр. Рконтр.	1,26 + 0,13 69,5 3,70 <0,01	0,90 + 0,13 49,7 6,01 <0,001	1,82 + 0,18 100,8 0,07 >0,05
Кастрация + ММ %контр. Тконтр. Рконтр. %кастр. Ткастр. Ркастр.	1,77 + 0,16 98,0 0,21 >0,05 140,9 2,52 <0,05	1,27 + 0,17 70,0 3,00 <0,05 140,8 1,74 >0,05	2,36 + 0,16 130,6 3,11 <0,01 129,6 2,26 <0,05
Кастрация + ТР %контр. Тконтр. Рконтр. %кастр. Ткастр. Ркастр. %ММ ТММ РММ	1,93 + 0,11 106,9 0,91 >0,05 153,7 3,97 <0,01 109,1 0,83 >0,05	1,43 + 0,20 78,9 1,76 >0,05 158,6 2,17 <0,05 112,6 0,61 >0,05	2,35 + 0,08 129,8 4,99 <0,001 128,7 2,72 <0,05 99,3 0,09 >0,05

зультаты максимально близкие к показателям непосредственной массаметрии: достоверное уменьшение в серии “кастрация” (1,26 + 0,134, или 70%), сохранение контрольных значений при введении апипрепаратов («кастрация + ММ» – 1,77 + 0,16, или 98%; «кастрация + ТР» – 1,93 + 0,11, или 107%) – на 5-й день; дальнейшее пропорциональное их уменьшение (“кастрация” – 0,90 + 0,13, или 50%; “кастрация + ММ” – 1,27 + 0,17, или 70%; “кастрация + ТР” – 1,43 + 0,20, или 79%) – на 10-й день. А вот равновыраженное их увеличение на 15-й день после кастрации на фоне назначения маточного молочка (2,36 + 0,16, или 131%) и трутневого расплода (2,35 + 0,08, или 130%) явилось более убедительным по сравнению с соответствующим показателем серии “кастрации” (1,82 + 0,18, или 101%).

Весовые коэффициенты для предстательной железы (табл. 32) не только на 5-й (“кастрация” – 0,66 + 0,07, или 74% от контроля; “кастрация +ММ” – 1,08 + 0,13, или 120%; “кастрация + ТР” – 1,15 + 0,09, или 127%) и на 10-й (“кастрация” – 0,43 + 0,09, или 48%; “кастрация + ММ” – 0,73 + 0,12, или 81%; “кастрация + ТР” – 0,77 + 0,09, или 85%) дни после тестэктомии, но и на заключительном этапе (“кастрация” – 0,84 + 0,08, или 93%; “кастрация + ММ” – 1,42 + 0,14, или 157%; “кастрация + ТР” – 1,57 + 0,11, или 174%) эксперимента полностью отразили направленность и сравнительную выраженность изменений выявленных при определении массы самой предстательной железы: ее гипотрофию в серии “кастрация” на 5- и 10-й дни и нормотрофию – на 15-й день, а в препаратных группах нормотрофию – на 5- и  10-й дни и гипертрофию – на 15-й день.

Отдельно следует отметить, что не было выявлено существенных и статистически подтвержденных изменений при прямой массаметрии и расчетах весовых коэффициентов по сравнению с контролем ни по одному показателю при 15-дневных введениях маточного молочка и трутневого расплода некастрированным животным, что дополнительно подтверждает отсутствие у них стимулирующего гонадотропного влияния в условиях нормотестостеронемии.

Таблица 32. Значения весовых коэффициентов для представительной железы
(масса представительной железы 1/100 массы тела)  крыс в контрольной и опытной  сериях

 

Сроки определения Серии	5-й день	10-й день	15-й день
Контроль 0,90 + 0,04	—	—	—
Интактные + ММ %контр. Тконтр. Рконтр.	— — — —	— — — —	0,88 + 0,05 97,8 0,31 >0,05
Интактные + ТР %контр. Тконтр. Рконтр.	— — — —	— — — —	0,88 + 0,10 97,8 0,19 >0,05
Кастрация %контр. Тконтр. Рконтр.	0,66 + 0,07 73,6 2,98 <0,05	0,43 + 0,09 47,5 4,62 <0,001	0,84 + 0,08 93,4 0,68 >0,05
Кастрация + ММ %контр. Тконтр. Рконтр. %кастр. Ткастр. Ркастр.	1,08 + 0,13 120,1 1,37 >0,05 163,2 2,95 <0,05	0,73 + 0,12 81,0 1,37 >0,05 170,7 2,01 >0,05	1,42 + 0,14 157,1 3,45 <0,01 168,3 3,54 <0,01
Кастрация + ТР %контр. Тконтр. Рконтр. %кастр. Ткастр. Ркастр. %ММ ТММ РММ	1,15 + 0,09 126,9 2,57 <0,05 172,5 4,44 <0,001 105,7 0,41 >0,05	0,77 + 0,09 85,3 1,35 >0,05 179,7 2,64 <0,05 105,3 0,26 >0,05	1,57 + 0,11 173,9 5,58 <0,001 186,3 5,36 <0,001 110,7 0,83 >0,05

Таким образом, анализ динамики значений весовых коэффициентов для семенника, семенных пузырьков и предстательной железы подтвердили биохимические и прямые массаметрические результаты о достаточно отчетливом и практически равновыраженном гонадотропном эффекте маточного молочка и трутневого расплода в условиях выбранной экспериментальной модели. При этом, обращает на себя внимание тот факт, что по абсолютным значениям большинства параметров трутневый расплод несколько превосходил соответствующее действие маточного молочка. Не исключено, что при увеличении объема исследования, включая расширение дозового диапазона, эти различия могли приобрести достоверный характер.

Диссертация Бурмистровой Л.А. “Физико-химический анализ и биохимическая оценка биологической активности трутневого расплода”. Введение.

Диссертация Бурмистровой Л.А. “Физико-химический анализ и биохимическая оценка биологической активности трутневого расплода”. Глава 1.

Диссертация Бурмистровой Л.А. “Физико-химический анализ и биохимическая оценка биологической активности трутневого расплода”. Глава 2.

Диссертация Бурмистровой Л.А. “Физико-химический анализ и биохимическая оценка биологической активности трутневого расплода”. Глава 3. Часть 1.

Диссертация Бурмистровой Л.А. “Физико-химический анализ и биохимическая оценка биологической активности трутневого расплода”. Глава 3. Часть 2.

Диссертация Бурмистровой Л.А. “Физико-химический анализ и биохимическая оценка биологической активности трутневого расплода”. Глава 3. Часть 3.

Диссертация Бурмистровой Л.А. “Физико-химический анализ и биохимическая оценка биологической активности трутневого расплода”. Глава 3. Часть 4.

Диссертация Бурмистровой Л.А. “Физико-химический анализ и биохимическая оценка биологической активности трутневого расплода”. Глава 4.

Диссертация Бурмистровой Л.А. “Физико-химический анализ и биохимическая оценка биологической активности трутневого расплода”. Выводы.